Elucidation of neuro-hydrodynamic signaling linkage in heat stroke and sepsis (systemic inflammation) in the acute to mid- and long-term.

2022年度は，新たにICRマウスを用いて熱中症モデルのプロトコルの確立をおこなった．理由としては, C57BL6Jは様々なKOマウスがあり，今後の実験がしやすい動物である．しかし，C57BL6Jは個体が約20-30gと小さく, 採血による液性シグナルを検討するには大量の動物が必要となる．一方m ICRマウスは個体が30－40gとC57BL6Jに比較して大きい. 採血量に関しても, 最大1.5mlの採血が可能で, 採血検体を用いることでELISAの多くの項目の解析が可能である. 動物愛護の観点からも，2系統で実験をおこなうことが今後の実験において必要であると考えた.COVID-19の診療が多忙であった前半はなかなか実験が進まず苦労したが, やや落ち着いた後半から条件検討を繰り返しおこなった. 結果，ICRマウスはC57BL6Jと比較して，熱感受性が高い．このため， 同じ暑熱暴露条件ではほぼ全滅してしまった．湿度は同じにして, 暑熱暴露条件の温度を下げ, 複数のプロトコルを用いて検討をおこなった. 結果, 3時間かけておこなっている余熱の条件を一定ではなく, 40℃→41℃→38℃と段階的に調節することで, 熱中症チャンバー内の温度が安定し, 結果が得られるようになった．この条件下で前回と同じ生存率70-80%で, 深部体温も41℃とほぼ同じ条件を達成できた．熱中症にともなう臓器傷害についても検討したところ，中枢神経傷害, 肝臓, 腎機能障害, 凝固異常が暑熱暴露後48時間後に著明に確認できた．熱中症により虚血, 全身性炎症症候群(SIRS)が惹起され多臓器障害をきたいしていると考えた．また， 血清を用いてNeurofilamentを測定したところ, 熱中症から1週間後に有意に上昇しており, C57BL6Jモデルと同様に熱中症1週間後でも神経炎症が続いていることが示唆された.

2022年度は，新たにICRマウスを用いて熱中症モデルのプロトコルの確立をおこなった．理由としては, C57BL6Jは様々なKOマウスがあり，今後の実験がしやすい動物である．しかし，C57BL6Jは個体が約20-30gと小さく, 採血による液性シグナルを検討するには大量の動物が必要となる．一方m ICRマウスは個体が30－40gとC57BL6Jに比較して大きい. 採血量に関しても, 最大1.5mlの採血が可能で, 採血検体を用いることでELISAの多くの項目の解析が可能である. 動物愛護の観点からも，2系統で実験をおこなうことが今後の実験において必要であると考えた.COVID-19の診療が多忙であった前半はなかなか実験が進まず苦労したが, やや落ち着いた後半から条件検討を繰り返しおこなった. 結果，ICRマウスはC57BL6Jと比較して，熱感受性が高い．このため， 同じ暑熱暴露条件ではほぼ全滅してしまった．湿度は同じにして, 暑熱暴露条件の温度を下げ, 複数のプロトコルを用いて検討をおこなった. 結果, 3時間かけておこなっている余熱の条件を一定ではなく, 40℃→41℃→38℃と段階的に調節することで, 熱中症チャンバー内の温度が安定し, 結果が得られるようになった．この条件下で前回と同じ生存率70-80%で, 深部体温も41℃とほぼ同じ条件を達成できた．熱中症にともなう臓器傷害についても検討したところ，中枢神経傷害, 肝臓, 腎機能障害, 凝固異常が暑熱暴露後48時間後に著明に確認できた．熱中症により虚血, 全身性炎症症候群(SIRS)が惹起され多臓器障害をきたいしていると考えた．また， 血清を用いてNeurofilamentを測定したところ, 熱中症から1週間後に有意に上昇しており, C57BL6Jモデルと同様に熱中症1週間後でも神経炎症が続いていることが示唆された.