βーヘキソ-スアミニダ-ゼαサブユニット異常症(TayーSachs病)の遺伝子解析

β-己糖胺酶α亚基疾病（泰-萨克斯病）的遗传分析

• 批准号: 03265215
• 负责人: 田中 あけみ
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03265215/
• 关键词: βーヘキソ-スアミニダ-ゼ; TayーSachs病

TayーSachs病は、βーヘキソ-スアミニダ-ゼのαサブユニット遺伝子の異常によりおこる単ー遺伝子病である。日本人のTayーSachs病患者17例についてこの遺伝子を解析した。[対象と方法]酵素活性よりTayーSachs病と診断された17例について13例は培養皮膚繊維芽細胞を、1例は培養リンバ芽球を、3例は剖検肝を検索の材料とした。3例については両親も検索した。症例はすべて血族結婚の家族歴はなく、症例間の血縁もない。臨床型は全てinfantile formであった。皮膚繊維芽細胞、リンパ芽球は各々通常の方法で培養した。1例についてtotal RNAを抽出し、RTーPCR(reverse transcriptationーpolymerase chain reaction)を行った。全例についてgーDNAを抽出し、PCRを行った。PCR産物をpUC18/19にクロ-ニングし、2本鎖のまま上流、下流の両測からサンガ-法にて塩基配列を決定した。PCR産物をメンブレンフィルタ-にブロットし、 ^<32>PでラベルしたASO(allele specific oligonucleotide)をブロ-プとし、変異遺伝子をスク-リングした。[結果]1症例についてRTーPCRを行いαサブユニットのcーDNAを得たところ、正常長より約100bp短いものが得られた。この塩基配列を調べた結果、エクソン6の完全欠失を認めた。そこで、エクソン6の5'側、3'側のイントロンとの接合部を含む部分をPCRで増幅し、塩基配列を求めたところ、イントロン5の3'末端の塩基GがTに変異していることが発見された。そこで全ての患者について同じ変異の有無をASOを用いてスクリ-ニングした結果、10例がこの変異のホモ接合体患者、6例がヘテロ接合体患者であった。すなわち、変異対立遺伝子の76%に同じ変異が見つけられた。また、ホモ接合体患者とヘテロ接合体患者との間に臨床症状の差異は無く、ホモ接合体患者の地域的偏りも無かった。

は ー Tay Sachs disease, beta ー ヘ キ ソ - ス ア ミ ニ ダ - ゼ の alpha サ ブ ユ ニ ッ ト heritage 伝 child abnormal の に よ り お こ る 単 ー heritage 伝 child disease で あ る. Analysis of the cultural heritage of 伝 son を of 17 Japanese patients with <s:1> Tay <s:1> Sachs disease に に に て て て <s:1> を. [like と seaborne method] enzyme activity よ り ー Tay Sachs disease と diagnosis さ れ た 17 に つ い て in 13 は を culture skin 繊 d bud cells, 1 case of は cultivation リ ン バ gemmule を, 3 cases of は cutting 検 liver を 検 cable の material と し た. Three cases: に, に て, て, に, 検, sothada た. Case: すべて すべて consanguineous marriage <s:1> family history なく なく, cases of interfamily bloodline な な. Clinical type て all infantile formであった. Skin 繊 germ cells and リ パ パ bud bulbs <e:1> are each 々 usually cultured by <s:1> method で for <s:1> た. One case of に に て て てtotal RNAを was extracted and を lines were subjected to RT <s:1> PCR(reverse transcriptation <s:1> polymerase chain reaction) った. For the entire case, に に て てg を DNAを extraction に, PCRを rows った. PCR products を pUC18/19 に ク ロ - ニ ン グ し, 2 this lock の ま ま upper-class, obscene の struck measuring か ら サ ン ガ - method に て salt base with column を decided し た. PCR products を メ ン ブ レ ン フ ィ ル タ - に ブ ロ ッ ト し, ^ < > 32 P で ラ ベ ル し た ASO (allele specific oligonucleotide) を ブ ロ - プ と し, - different heritage 伝 son を ス ク - リ ン グ し た. Cases. [results] 1 に つ い て RT PCR line を い ー alpha サ ブ ユ ニ ッ ト の c ー DNA を so た と こ ろ, long normal よ り about 100 bp short い も の が must ら れ た. The べた results of the を coordination of the <s:1> base, エ <s:1> ソ <s:1> べた 6 are completely lacking in を recognition めた. そ こ で, エ ク ソ ン 6 の 5 'side, 3' side の イ ン ト ロ ン と の joints を part containing む を PCR で raised し picture, salt base with column を o め た と こ ろ, イ ン ト ロ ン 5 の 3 'end の salt base G が T に - different し て い る こ と が 発 see さ れ た. そ こ で full て の patients に つ い て with じ variations have different の without を ASO を with い て ス ク リ - ニ ン グ し た results, 10 cases が こ の - different の ホ モ gametes, 6 patients with が ヘ テ ロ gametes patients で あ っ た. Youdaoplaceholder0, in contrast to the heritage of 伝, 76%に and じ, in contrast to が, see けられた けられた. ま た, ホ モ gametes patients と ヘ テ ロ gametes patients と の は に clinical symptoms の differences between く, ホ モ gametes の region in patients with partial り も no か っ た.

项目成果

多田 明央,正寿 康夫,田中 あけみ: "内分泌・代謝性疾患と心節疾患" 小児内科. 2. 1595-1604 (1991)

Akio Tada、Yasuo Masatoshi、Akemi Tanaka：“内分泌/代谢疾病和心脏疾病”小儿内科。2. 1595-1604 (1991)

RoseーMary N.Boustany,Akemi Tanaka,Junji Nishimoto and Kunihiko Suzuki: "Genetic Cause of a Juvenile Form of TayーSachs Disease in a Lebanese Child." Annals of Neurology. 29. 104-107 (1991)

Rose-Mary N. Boustany、Akemi Tanaka、Junji Nishimoto 和 Kunihiko Suzuki：“黎巴嫩儿童青少年泰萨克斯病的遗传原因”，《神经病学年鉴》29。104-107。

Horst Klima,Akemi Tanaka,Doris Schnabel,Takeshi,Nakano,Maria Schoder,K.Suzuki,et al.: "Characterization of Fullーlength cーDNAs and the Gene Coding for the Human GM2 Activator Protein." FEBS letter. 289. 260-264 (1991)

Horst Klima、Akemi Tanaka、Doris Schnabel、Takeshi、Nakano、Maria Schoder、K. Suzuki 等人：“人类 GM2 激活蛋白 289 的全长 c-DNA 的表征和基因编码。” 260-264 (1991)

田中 あけみ,他(分担執筆): "今日の小児治療指針 第9版" 医学書院, 784 (1992)

Akemi Tanaka 等人（合著者）：《今日儿科治疗指南第 9 版》Igakushoin，784 (1992)

Junji Nishimoto,Akemi,Tanaka,Eiji Nakano and Kunihiko Suzuki: "Expression of the ーHexosaminidase Subunit Gene with the Fourーbase Insertion of Infantile Jewish TayーSachs Disease." The Journal of Biological Chemistry. 266. 14306-14309 (1991)

Junji Nishimoto、Akemi、Tanaka、Eiji Nakano 和 Kunihiko Suzuki：“婴儿犹太泰萨克斯病的 β-己糖胺酶亚基基因的表达”，266。14306-14309（1991）。