课题基金 / 基金详情

植物パ-オキシゾ-ム蛋白質局在化の分子機構

植物パ-オキシゾ-ム蛋白質局在化の分子機構
植物过氧化物酶体蛋白定位的分子机制
批准号：
03264220
负责人：
西村 幹夫
金额：
$0.96万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1991 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03264220/
关键词：
Malate synthaseGlycolate oxidasecDNAクロ-ニングパ-オキシゾ-ムグリオキシゾ-ムタンパク質の局在化

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
カボチャ発芽種子の子葉組織から調製したmRNAを鋳型として、cDNAライブラリ-を作製し、特異抗体を用いてパ-オキシゾ-ムに局在する酵素であるmalate synthaseとglycolate oxidaseのcDNAをクロ-ニングし、その塩基配列を決定して、これらタンパク質の一次構造解析を行った。その結果および精製酵素のN末端アミノ酸配列の比較から、これらの酵素は原酵素と同じ分子量のポリペプチドとして合成されることを明らかにした。得られたこれらのcDNAをin vitroで転写翻訳させ、その産物を単離したパ-オキシゾ-ムとインキュベ-トすることにより、その翻訳産物をパ-オキシゾ-ムへ移行させることに成功した。この結果は、パ-オキシゾ-ムへのタンパク質の移行はタンパク質の翻訳された後に起こることを示している。malate synthaseとglycolate oxidaseはそれぞれ植物パ-オキシゾ-ムの中で機能の異なるパ-オキシゾ-ムであるグリオキシゾ-ムと緑葉パ-オキシゾ-ムに局在することが知られている。上記in vitroのタンパク質移行系を用いて、malate synthaseとglycolate oxidaseのグリオキシゾ-ムおよび緑葉パ-オキシゾ-ムへの取り込みを解析した結果、これら2個のパ-オキシゾ-ムタンパク質はどちらのパ-オキシゾ-ムにも輸送されることが判明した。このことから、グリオキシゾ-ムと緑葉パ-オキシゾ-ムへのタンパク質の局在化機構は類似していることが示唆された。
英文摘要
カボチャ発芽種子の子葉組織から調製したmRNAを鋳型として、cDNAライブラリ-を作製し、特異抗体を用いてパ-オキシゾ-ムに局在する酵素であるmalate synthaseとglycolate oxidaseのcDNAをクロ-ニングし、その塩基配列を決定して、これらタンパク質の一次構造解析を行った。その結果および精製酵素のN末端アミノ酸配列の比較から、これらの酵素は原酵素と同じ分子量のポリペプチドとして合成されることを明らかにした。得られたこれらのcDNAをin vitroで転写翻訳させ、その産物を単離したパ-オキシゾ-ムとインキュベ-トすることにより、その翻訳産物をパ-オキシゾ-ムへ移行させることに成功した。この結果は、パ-オキシゾ-ムへのタンパク質の移行はタンパク質の翻訳された後に起こることを示している。malate synthaseとglycolate oxidaseはそれぞれ植物パ-オキシゾ-ムの中で機能の異なるパ-オキシゾ-ムであるグリオキシゾ-ムと緑葉パ-オキシゾ-ムに局在することが知られている。上記in vitroのタンパク質移行系を用いて、malate synthaseとglycolate oxidaseのグリオキシゾ-ムおよび緑葉パ-オキシゾ-ムへの取り込みを解析した結果、これら2個のパ-オキシゾ-ムタンパク質はどちらのパ-オキシゾ-ムにも輸送されることが判明した。このことから、グリオキシゾ-ムと緑葉パ-オキシゾ-ムへのタンパク質の局在化機構は類似していることが示唆された。
期刊论文(8)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
L.De Bellis: "Development of enzymes of the glyoxylate cycle during senescence of the pumpkin cotyledons." Plant Cell Physiology. 32. 555-561 (1991)
L.De Bellis：“南瓜子叶衰老过程中乙醛酸循环酶的发育。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
M.Nishimura: "Molecular Approaches on Compartmentation and Metabolic Regulation Intracellular protein trafficking in oil seed." The American Society of Plant Physiologists, 9 (1991)
M.Nishimura：“油料种子细胞内蛋白质运输的区室和代谢调节的分子方法。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
H.Mori: "Pumpkin malate synthase.Cloning and sequencing of the cDNA and Northern blot analysis." Eur.J.Biochemistry. 197. 331-336 (1991)
H.Mori：“南瓜苹果酸合酶。cDNA 的克隆和测序以及 Northern 印迹分析。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
L.De Bellis: "Glyoxylate cycle enzymes in peroxisomes isolated from petals of pumpkin during senescence." Plant Cell Physiology. 32. 1227-1235 (1991)
L.De Bellis：“在衰老过程中从南瓜花瓣中分离出过氧化物酶体中的乙醛酸循环酶。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
種子の脂肪性およびデンプン性を決定する分子機構の解析
  • 批准号：
    19657020
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.24万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    西村 幹夫
  • 依托单位：
    National Institute for Basic Biology
新規のチラコイド膜輸送機構の解析
  • 批准号：
    13874113
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $1.28万
  • 财政年份：
    2001
  • 负责人：
    西村 幹夫
  • 依托单位：
    Okazaki National Research Institutes
高等植物におけるオルタナティブスプライシングによる情報発現制御
  • 批准号：
    10874123
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $1.28万
  • 财政年份：
    1998
  • 负责人：
    西村 幹夫
  • 依托单位：
    Okazaki National Research Institutes
高等植物の液胞の機能分化を支える膜蛋白質の変動
  • 批准号：
    10219209
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $23.04万
  • 财政年份：
    1998
  • 负责人：
    西村 幹夫
  • 依托单位：
    Okazaki National Research Institutes