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マクロファージ特異的遺伝子発現マウスの作出

表达巨噬细胞特异性基因的小鼠的产生

基本信息

批准号：
04206204
负责人：
樋口安典
金额：
$ 1.6万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至 1994
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04206204/
关键词：
CD14 osteopontin MS2 transgenic mouse shock metastasis collagenase

项目摘要

1.CD14遺伝子TGマウスの作成:未変異および変異および変異マウスCD14ケノム遺伝子の5'上流に肝細胞特異的蛋白α_2Uグロビンのプロモーター、3'末端にSV40のポリAシグナルを結合した変異CD14遺伝子を作成し、BDA/2Ncrj/C57BL/6NcrjF1マウスの授精卵に注入し、ICR偽妊娠マウスで発生させた。現在まで膜結合型およびPI結合部を改変し膜非結合型にしたCD14遺伝子トランスジェニック(TG)マウスを各々一匹づつ得ており、現在pairingによりこれらのTGマウスの増殖を行っている。これらはいずれもCD14の常時発現系であるが、誘導発現系としてメタロチオネイン遺伝子のプロモーターを連結したTGマウスも作成中である。さらに純系TGマウスの作成もC57BL/6Jマウスを用いて試みている。2.CD14遺伝子TGマウスにおけるCD14の発現および副次変化の検索:肝臓およびその他の組織における発現状態についてのノーザン法およびPAP法での解折はまだ使用可能なF2が得られていないため行っていない。一方、C57BL/6Jマウスではこれまで高い頻度で食仔されること、および生在中の一匹の発育が異常に悪いことなどを経験しており、これらがTGと関連した現象か否かを検討中である。3.TGマウスを用いたLPSショックの解折はこれからである。4.OPおよびMS2遺伝子TGの作成:OPを常時発現したTGマウス、誘導による発現が可能なTGマウスをCD14遺伝子TGと同一のプロモーターシステムで作成中であり、現在、PCRおよびサザンブロットで検討中であるが、まだ、TGは得られていない。5.TGマウスにおけるOP発現状態の検索およびOP遺伝子TGマウスを用いた転移実験はこれからである。6.M52遺伝子TGの作成:MS2の機能としてコラゲナーゼおよび血小板凝集阻止因子機能が明かになった。現在本遺伝子を改変中である。7.遺伝子標的法によるCD14遺伝子廃失マウスの作成:いくつかの相同組替えES細胞を分離しており、発生初期胚注入を検討中である。

1. CD14 gene TG is produced by the following methods: undifferentiated, CD14 gene 5'upstream hepatocyte specific protein α_2U, SV40 3' terminal protein A, BDA/2Ncrj/C57BL/6NcrjF1, injection of fertilized eggs, ICR pseudopregnancy. Now the membrane binding type and PI binding part are changed to the membrane non-binding type, CD14 gene is changed to the TG binding part, and the TG binding part is changed to the TG binding part. The CD14's constant occurrence system is linked to the induced occurrence system. The pure TG is made of C57BL/6J. 2. CD14 gene TG can be used to detect CD14's occurrence and secondary transformation: liver and other tissues can be used to detect the occurrence state of CD14. PAP method can be used to detect CD14's decomposition. A side, C57BL/6J, it's a high frequency, it's a high frequency. 3. TG is used in LPS analysis. 4. OP and MS2 gene TG creation:OP is always present, TG is induced, TG is likely to be present, TG is CD14 gene TG and the same gene is produced, PCR is present, TG is induced, TG is produced. 5. TG 6. M52 gene TG: MS2 function and platelet aggregation prevention factor function. Now this heritage is being changed. 7. CD14 gene transfer method: isolation of ES cells, embryo injection at early stage of development