ファルネシルニリン酸の尾部一尾部二量化酵素とその反応機構に関する研究

法尼基二磷酸单尾二聚酶及其反应机制的研究

• 批准号: 04220209
• 负责人: 西野 徳三
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04220209/
• 关键词: スクアレン合成酵素; ファルネシルニリン酸合成酵素; フィトエン合成酵素

1.今回のスクアレン合成酵素も膜結合型の酵素であった。さらに、デヒドロスクアレン合成酵素も膜結合型であったが両者共、細胞破砕処理によって簡単に可溶化される位の弱い結合型酵素であることがわかった。2.高度好熱好酸菌Sulfolobus acdocaldariusの培養に成功せず、この研究計画を達成することはできなかった。長期保存により菌の性質が変化したものと思われた。代り別の高度好熱菌を用いて研究を進めたが、この菌では目的のジフィタニルグリセロールは生合成せず、この研究は中断せざるを得なかった。3.上記ジフィタニルグリセロールの生合成中間体、ゲラニルゲラニルニリン酸合成酵素が得られた。好熱菌の酵素という観点でこの遺伝子の単離を行い、現在シークエンスを行っている。4.中等度教熱菌Bacillus stearothermophilusのファルネシルニリン酸合成酵素遺伝子を単離し、クローニング、シークエンスを行った。さらに、これを大腸菌に形質転換し大量発現させる系を確立した。酵素の結晶化にも成功し、現在酵素学的な性質を調べている。5.表題の酵素の類似酵素であるフィトエン合成酵素の遺伝子クラスターの個々の同定に問題があった。そこで今回crtE遺伝子を調べゲラニルゲラニルニリン酸合成酵素であると訂正した。現在この遺伝子の大量発現系を確立する為研究を進めており、その後フィトエン合成酵素の研究に進む予定である。

1. This time, ス ス アレ アレ アレ synthesizes enzyme ス membrane-bound enzyme であった. さ ら に, デ ヒ ド ロ ス ク ア レ ン も synthetic enzyme membrane type combined で あ っ た が struck a total, cell broken 砕 処 Richard に よ っ て Jane 単 に solubilization さ れ る a weak の い combination type enzyme で あ る こ と が わ か っ た. 2. High thermal good acid bacteria Sulfolobus acdocaldarius の training に success せ ず, こ の research projects を reached す る こ と は で き な か っ た. For long-term preservation, the <s:1> properties of によ によ bacteria が will undergo が changes, た, <s:1> と, and われた. Heat generation り don't の highly good bacteria を with い を て research into め た が, こ の bacteria で は purpose の ジ フ ィ タ ニ ル グ リ セ ロ ー ル は biosynthesis せ ず, こ の research は interrupt せ ざ る を must な か っ た. 3. The above record indicates that ジフィタニ, グリセロ, グリセロ, <s:1> are synthesizing intermediates, ゲラニ, ゲラニ, ニリ, <s:1> are synthesizing acids and enzymes, and が is られた. So hot in the fungus の enzyme と い う 観 point で こ の heritage 伝 son の 単 line from を い, now シ ー ク エ ン ス を line っ て い る. 4. Heat medium degree taught bacterium Bacillus stearothermophilus の フ ァ ル ネ シ ル ニ リ ン acid synthesis enzyme heritage 伝 son を 単 し, ク ロ ー ニ ン グ, シ ー ク エ ン ス を line っ た. Youdaoplaceholder0, れを れを coliform に mass 転 exchange <s:1> large occurrence させる line を establishment た た. The crystallization of the enzyme に に is successful, and now the な properties of enzymology are を regulated べて る る る. 5. The title of the table: enzyme, similar enzyme, であるフィトエ, synthetic enzyme, cultural heritage, 伝 sub-enzyme, <s:1> ラスタ, ラスタ, 々, 々, the same に problem があった. そ こ で today back crtE heritage 伝 son を adjustable べ ゲ ラ ニ ル ゲ ラ ニ ル ニ リ ン acid synthesis enzyme で あ る と correction し た. Now こ の posthumous son 伝 の large 発 を now department establish す る を for research into め て お り, そ の after フ ィ ト エ ン に の research into synthetic enzyme む designated で あ る.

项目成果

西野 徳三: "新生化学実験講座 第4巻 脂質" 東京化学同人, (1993)

西野德三：《新生物化学实验教程第4卷脂质》东京化学同人，（1993）

T.Koguma: "Thermostable Farnesyl Diphosphate Synthase of Bacillus stearothermophilus:Nolecular cloning Seguence Detrmination,Overproduction,and Purification" J.Biochem.113. 355-363 (1993)

T.Koguma：“嗜热脂肪芽孢杆菌的热稳定法尼基二磷酸合成酶：分子克隆序列测定、过量生产和纯化”J.Biochem.113。