エバネセント波法による脂質膜界面における抗原抗体反応の速度論的研究
倏逝波法研究脂膜界面抗原抗体反应动力学
基本信息
- 批准号:04220216
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1992
- 资助国家:日本
- 起止时间:1992 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
生命現象において重要な細胞膜上における分子認識過程の動力学的研究を目的として、界面における分子の会合・解離の過程をリアルタイムで観測できるエバネセント波法により、(1)高分子界面へのタンパク質の非特異的結合、(2)高分子界面における抗原抗体反応、(3)脂質膜上における抗原抗体反応の順に検討した。(1)についてはタンパク質溶液をポリメチルメタクリレート(PMMA)製のキュベットに注入することにより得られた初期結合速度と、界面へのタンパク質の結合が拡散律速で起きるとした場合の結合速度の理論値との比(R)により議論した。ヒト血清アルブミンHSA、卵白アルブミンOVA、ヒト免疫グロブリンIgGのいずれの場合にもRは1よりも小さかった。またタンパク質の等電点付近で最大値を示すこと、Rに対するイオン強度の影響が見られないことから、タンパク質の界面への非特異的結合には疎水性相互作用が、静電相互作用よりも重要であることが判明した。(2)については、前述のPMMA製のキュベットにあらかじめHSAとOVAの溶液をそれぞれインキュベートし不可逆的に吸着させておき、そこに抗HSA抗体を注入したところ、抗体は速やかにHSA界面に結合していくのに対してOVAにはほとんど結合せず、特異的な免疫反応の有無により結合に大きな差があった。抗原HSAの表面密度と抗体の結合速度の相関を調査したところ、HSAの表面密度が約25%でRが飽和に達した。(3)については、ハプテンとして2,4-ジニトロフェニル(DNP)基を有した脂質を種々の比率で混合した脂質単分子膜を移積した測定キュベットを用いて、[1][2]と同様の手法を用いて蛍光標識抗DNP抗体の結合過程を観察した結果、単分子膜内のハプテン脂質の割合が5、7、10、20%と変化させた場合のR値はそれぞれ0.020,0.052,0.085,0.113となり、脂質膜表面に存在するハプテンの密度が抗体の結合速度に及ぼす影響が明らかとなった。
The purpose of this study is to investigate the dynamics of molecular recognition processes on cell membranes, which are important for biological phenomena. The purpose of this study is to investigate the processes of molecular association and dissociation at the interface.(1) Nonspecific binding of molecules at the polymer interface.(2) Antigen antibody reaction at the polymer interface.(3) The sequential analysis of antigen antibody reaction at the lipid membrane. (1)The initial bonding velocity, the interface bonding velocity, the dispersion law velocity, the theoretical bonding velocity ratio (R), and the injection velocity of PMMA solution are discussed. The virus was found in HSA, egg white and egg white, and the virus was found in the middle of the virus. The maximum value of the isoelectric point of the substance is shown in the figure. The influence of the strength of the substance on the non-specific binding of the substance at the interface is shown in the figure. The electrostatic interaction is important. (2)In addition, the solution of HSA and OVA prepared by PMMA was injected with anti-HSA antibody, and the antibody was bound to OVA at the interface. The presence or absence of specific HSA immune reaction was also observed. The correlation between the surface density of antigen HSA and the binding speed of antibody was investigated. The surface density of HSA was about 25% and the binding speed was saturated. (3)The ratio of lipid species present in the 2,4-DNP group to lipid species present in the DNP group. 0.052, 0.085, 0.113. The density of the antibody on the lipid membrane surface affects the binding speed of the antibody.
项目成果
期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
谷本 智史: "Binding Kinetics of Antibodies to Antigens on Polymer Surfaces As Studied by the Multiple Internal Reflection Fluorescence Method" Langmuir. 9. (1993)
Satoshi Tanimoto:“通过多重内反射荧光方法研究抗体与聚合物表面抗原的结合动力学”Langmuir 9。(1993)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
長谷川 雅典: "Adsorption Kinetics of Proteins onto Polymer Surfaces as Studied by the Multiple Internal Reflection Flourescence Metnod" Langmuir. 8. 1582-1586 (1992)
Masanori Hasekawa:“通过多重内反射荧光 Metnod 研究蛋白质在聚合物表面上的吸附动力学”Langmuir,8. 1582-1586 (1992)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
北野 博巳: "新タンパク質応用工業" フジテクノシステム, (1993)
Hiromi Kitano:“新蛋白质应用产业”Fuji Techno System,(1993)
- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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