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視覚情報並列処理系への脳幹からの修飾機構ー外側膝状体中継細胞のイオンチャンネル解析ー

从脑干到视觉信息并行处理系统的修饰机制-外侧膝状体中继细胞的离子通道分析-

基本信息

批准号：
04246227
负责人：
福田淳
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目標はネコ外側膝状体のスライス標本にパッチクランプ法を適用し、外側膝状体の中継細胞におけるNa,K,Caイオンチャンネルの性質を明らかにし、次いでそれらのチャンネルを通る電流がアセチルコリン、ノルアドレナリン、セロトニンなどの局所投与によってどのように影響されのるかを調べるところにある。その予備的実験として本年度はin vitro網膜組織におけるCaチャネルの同定とそのGABAおよびアセチルコリンによる修飾機序について研究を行なった。孵卵3日目の鶏胚より網膜神経層を剥離摘出し、カルシウム蛍光指示薬(Fura2-AM)をロードした後、ピペットにより各種の試験溶液を投与し、直径50μmのスポット上にて蛍光測光を行ない、F340と380の蛍光強度の比から細胞内Ca濃度を経時的に算出した。その結果、高K外液で細胞膜を脱分極させると持続的な細胞内Ca濃度の上昇がみられ、種々の薬理学的検討からL型Caチャンネルを介するものであると同定された。次の外液へのGABAの投与によっても細胞内Ca濃度の上昇が生じ、この応答もL型Caチャンネルを介する反応であることがわかった。さらに細胞内記録と薬理学的検討の結果、GABA_A受容体を介したC1イオンの流出に伴う脱分極によって膜電位依存性Caチャネルが開いた結果と解釈された。次に外液へのアセチルコリンの投与によっても細胞内Ca濃度の著明な増加が確認されたが、この場合にはムスカリン受容体から細胞内のIP3を介したCa貯蔵からの遊離であることがわかった。今後同様の方法を用いて外側膝状体のスライス標本にて研究を進める計画である。

In this study, the external geniculate body, the outer geniculate body, the geniculate body, the geniculate body. The Ca is responsible for the distribution of information and information on the basis of the information and communication of the electric current. The investment and the investment of the bureau are related to each other. In this year's in vitro network organization, the Ca network organization will do the same as this year's GABA network organization. This year, the network organization will be the same as this year. Incubation for 3 days, after incubation for 3 days, the embryo network was peeled off, the Fura2-AM was used to determine the temperature, the solution was injected into the solution, the diameter was 50 μ m, the fluorescent light intensity was measured, and the F340-380 temperature was calculated when the intracellular Ca intensity was measured. The results showed that the cytosolic membrane of high K extracellular fluid was separated and the intracellular Ca of high K concentration was significantly higher than that of the control group (P < 0.05). The results showed that the results showed that the intracellular Ca of high K extracellular fluid was significantly different from that of high K extracellular fluid, and L-type DNA was confirmed by RT-PCR. In the second time, the external liquid (GABA) was added to the intracellular Ca (intracellular concentration), and the L-type Ca was introduced. In this study, the results of intracellular physiology were compared, and the results of GABA_A receptor medium C1 transient outflow with significant membrane potential dependence on Ca potential dependence were analyzed. In the second part of the study, the extracellular fluid is sensitive to the concentration of intracellular Ca. It is clear that it is necessary to confirm that the receptor is in good condition, and that the receptor is sensitive to intracellular IP3, Ca, Ca, and so on. In the future, the same method will be used to study the external geniculate body.