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Saccharomyces酵母を用いたペルオキシソームタンパク選別輸送の解析

使用酵母菌分析过氧化物酶体蛋白质分选运输

基本信息

批准号：
04259213
负责人：
田中渥夫
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はアルカン生育Cardida酵母の細胞内にペルオキシソーム(Ps)が多数発達することを世界で初めて発見し,栄養源である炭素化合物を変えることで,この発達を自在にコントロールできることを明らかにしてきた。このPs局在酵素をコードする遺伝子を単離し解析したところ,酵母のPaタンパクの輸送シグナルとして,最近一部のPs酵素の輸送シグナルであろうと推定されているC末のSKL配列とは異なったいくつかのグループが存在することが予測された。Psへの輸送にいくつかのpathwayや関与するいくつかの因子が考えられることから,より扱い易い系の採用が望まれるが,我々はPsの誘導発達条件の選択が難しかったSaccharomyces酵母でPaの誘導発達条件をすでに見い出した。そこで,この取り扱い易い酵母を用いてCandida酵母のPsタンパクの選択輸送の分子レベルでの解析系,いわゆるPs膜透過輸送のmachinery系を解析する系を確立することを目的とした。本年度得た成果は次のような点である。1.Saccharomyces酵母内の高発現タンパクのコドン選択がCandida酵母のPsタンパンのそれと同じであることから,Candida酵母のPsタンパクをコードする遺伝子(ここでは,イソクエン酸リアーゼ(ICL)を発現させたところ,細胞質可溶タンパクの30%を越える高発現がみられるとともに,Saccharomyces酵母内に発達させたPs内にこのICLタンパクを取り込まることに成功した。これにより,Paの発達の研究に最適のCandida酵母の系を遺伝子解析の容急なSaccharomycesの系とをin vivoでもin vitroでも相互に乗り入れて扱うことができ,今後の研究の大いなる進展の基盤ができた。2.ICLのC末AKVを欠損させた改変ICLタンパクを用いて選別輸送実験を行ったところ,改変タンパクもPsを選別認識することがわかったが,分解を受けやすいところからC末の立体構造への寄与が示唆された。

We found that most of the Cardida yeast cells were fertile, and most of them were in the first place in the world. The source was the carbon compound, the carbon compound was free, the yeast was free. The Ps Bureau is in charge of the analysis of the enzyme, the yeast, the Pa, the yeast, the Ps will send you information on pathway and other factors. If you want to see if you want to meet the requirements, we will use Ps to guide you to meet the conditions. You will need to select the Saccharomyces yeast Pa to guide you to meet the conditions. In this paper, we use the Candida yeast Ps yeast to select the molecular molecular analysis system, and then use the machinery membrane to make sure that the purpose of the system is correct. I got the results for the first time this year. In 1.Saccharomyces yeast, the higher the concentration of Ps, the higher the temperature, and the higher the cell solubility. The higher the temperature, the higher the temperature. The higher the temperature, the higher the cell solubility. The higher the temperature, the higher the temperature. The Saccharomyces yeast was successfully extracted from the yeast ICL in Ps. The most important part of the Pa research is the analysis of the most important Candida yeast system, the Saccharomyces system, the in vivo system, the in vitro system, the rapid growth of each other, and the development of future research. At the end of the 2.ICL system, you need to change the ICL system. You can choose to send your bank information, and you can change your Ps to understand your information, and decompose the information you need to send it to you.