単一遺伝子病の分子・細胞生物学的研究、疾患発症の分子機構の解明

单基因疾病的分子细胞生物学研究，阐明疾病发病的分子机制

• 批准号: 04260102
• 负责人: 松田 一郎
• 金额: $ 69.12万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04260102/
• 关键词: 先天代謝異常; 遺伝子解析; モデル動物; レセプター異常; 細胞小器官異常; 遺伝子導入; 遺伝子発現

1.新しい遺伝子の単離・同定とその変異解析ホロカルボキシラーゼ合成酵素(成沢)、ガラクトセレブロシダーゼ、クラベ病病因酵素(岡田)、フマリルアセト酢酸分解酵素、高チロジン血症I型病因酵素(松田)、betaヒドロキシフェニルピルビン酸酸化酵素、高チロジン血症III型病因酵素(松田)などの遺伝子が世界に先駆けて単離・同定された。ホモカルボキシラーゼ合成酵素欠損症、高チロジン血症I型については変異遺伝子が同定された。また高チロジン血症III型についてはモデル動物でexon 7のスキップが見出された。ムコ多糖体症(折居)のII,IVA,VIIの各型についての責任遺伝子の単離・同定、さらに変異遺伝子の解析が行われた。いずれも世界最初である、IVA型の変異遺伝子の中には日本人、欧米人に共通してdouble gene deletionがあることを見い出した。2.新しい酵素異常症の責任遺伝子の単離・同定極長鎖アシルCoAデヒドロゲナーゼ欠損症を、11例の患者で確認し、さらにその責任遺伝子、変異遺伝子を単離・同定した(橋本)。3.遺伝子治療を目標とした基礎研究Gaucher病、metachromatic leukodystrophyの変異遺伝子解析を日本人患者について行い、それぞれ60%,50%に特定の変異遺伝子が見出された。さらに、マウス骨髄細胞を目標細胞に選びそれぞれの遺伝子(cDNA)をレトロウイルスベクターを用いて遺伝子導入を試み、成功した。4.糖尿病の遺伝子解析ミトコンドリア遺伝子tRNA^<LEU(UUR)>の3243A→Gの変異について、母子共にIDDMの300家系をスクリーニングし、4家系にそれをみつけた。またslowly progressive IDDMの患者27名中3名にも同じ変異遺伝子をみつけた(岡)。NIDDMの患者について、グリコーゲン合成酵素遺伝子多型を解析し、一部の患者で特定の遺伝子多型との間に有意の相関を見出した(北川)。5.トランスジェニックマウスを用いた研究疾患モデル動物の作製に際して、遺伝子の相関組み換え率を高めるため、ベクターの安定性について検討した(島田)、その結果、3′末端部位を修飾することで、その目的を達することができることが判明した。6.哺乳類発生異常の遺伝解析マウスMHCのK領域の近くに胎生致死をおこすt^<w5>変異が存在することも見出し、その変異遺伝子の単離同定を試みた(阿部)。また同定に成功していないが、有力な候補者を見出し研究を続けている。

1. New し い posthumous son 伝 の 単 leaves, with fixed と そ の - different analytical ホ ロ カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ synthetase (ohsawa), ガ ラ ク ト セ レ ブ ロ シ ダ ー ゼ, ク ラ ベ enzyme (okada) disease etiology, フ マ リ ル ア セ ト boggy acid decomposition enzyme, high チ ロ ジ ン hematic disease cause enzyme (matsuda) type I, beta ヒ ド ロ キ シ フ ェ ニ ル ピ ル ビ ン acid acidification enzyme The etiological enzyme of hyperチ ロジ <s:1> blood disease type III (matsuda)な <s:1> cultural heritage 伝 が world に first 駆けて単 separate and determine された. ホ モ カ ル ボ キ シ ラ ー ゼ synthetic enzyme owe loss, high チ ロ ジ ン disease type I に つ い て は - different heritage 伝 が son be さ れ た. Youdaoplaceholder0 hyperチ ロジ emasemia type III に て て モデ モデ モデ で animals でexon 7 <s:1> スキップが is seen in された. ム コ polysaccharide body disease (passbook) in の II, IVA, VII の each に つ い て の responsibility heritage 伝 son の 単 from be, さ ら に - different heritage 伝 son の parsing line が わ れ た. い ず れ も world first で あ る, IVA の - different heritage 伝 child の に は Japanese, omega is common people に し て double gene deletion が あ る こ と を see い out し た. 2. New し い enzyme abnormal disease の responsibility heritage 伝 son の 単 from, be very long locks ア シ ル CoA デ ヒ ド ロ ゲ ナ ー ゼ owe loss disease を, 11 patients with の で confirm し, さ ら に そ の responsibility heritage 伝 son, - different heritage 伝 son を 単 leaves, with fixed し た (hashimoto). 3. Heritage 伝 を son treatment target と し た basic research Gaucher disease, metachromatic leukodystrophy の - different analytical を Japanese patients survived 伝 son に つ い て い, そ れ ぞ れ 60%, 50% に specific の - different heritage 伝 が son see a さ れ た. さ ら に, マ ウ ス を target cells in bone marrow cells に choose び そ れ ぞ れ の heritage 伝 child (cDNA) を レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を with い て heritage 伝 import を try み, successful し た. 4. Diabetes の posthumous son 伝 parsing ミ ト コ ン ド リ ア posthumous son 伝 tRNA ^ < LEU (UUR) > の の 3243 - a - G - different に つ い て, mother-child に IDDM の 300 family を ス ク リ ー ニ ン グ し, four に そ れ を み つ け た. Among the 27 patients with またslowly progressive IDDM, 3 were に じ and じ mutant 伝 offspring をみ けた けた けた(gang). Patients with NIDDM の に つ い て, グ リ コ ー ゲ ン synthetic enzyme heritage 伝 type more analytical し を, traces of a specific の の patients で 伝 son polymorphism と の に intentionally の phase between masato を shows し た (beichuan). 5. ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を with い た study disease モ デ ル animal の cropping に interstate し て み masato group, but 伝 の phase in high rate of え を め る た め, ベ ク タ ー の stability に つ い て beg し 検 た (virtual), そ の results, 3 'end place を decorate す る こ と で, そ を の purpose of す る こ と が で き る こ と が.at し た. 6. Mammals 発 raw traces of abnormal の 伝 parsing マ ウ ス MHC の の K field near く に viviparous death を お こ す t ^ < w5 > variations exist different が す る こ と も see し, そ の - different heritage 伝 son の 単 from be を try み た (Abe). ま た with fixed に successful し て い な い が, powerful な alternates を shows し research を 続 け て い る.

项目成果

Yamaguchi S.,et al.: "Biochemical and immunological stydy of seven familiees with 3-ketotiolase deficiency:diagnosis of heterozygotes using immunochemical detetmination of the ratio of mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolase protein." Prdiatric Research. 3

Yamaguchi S.,et al.：“7 个 3-酮硫解酶缺乏症家族的生化和免疫学研究：通过免疫化学测定线粒体乙酰乙酰辅酶 A 硫解酶蛋白的比例来诊断杂合子。”

Matsuura T.,er al.: "Four novel gene mutation in five Japanese male patients with neonatal or late onset OTC deficiency:Application of PCR-SSCP for all exons and adjacent introns." Human Genet.92. 49-56 (1993)

Matsuura T.,er al.：“五名患有新生儿或迟发性 OTC 缺陷的日本男性患者的四种新基因突变：PCR-SSCP 在所有外显子和相邻内含子中的应用。”

Ohura T.,et al: "The molecular defict in propionic acidemia : exon skipping caused by an 8-bp deletion from an intron tn the PCCB allele." Human Genet.92. 397-402 (1993)

Ohura T.等人：“丙酸血症的分子缺陷：PCCB 等位基因内含子 8 bp 缺失导致外显子跳跃。”

Yamaguchi S.,et al.: "Identification of very long chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency in three patients previously diagnosed with long chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency." Pediatric Research. 34. 111-113 (1993)

Yamaguchi S.,et al.：“在三名先前诊断为长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症的患者中鉴定出极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症。”

Fukao T.,et al.: "Molecular studies of mitochondrial acetoacetyl coenzyme A thiolase deficiency in the two original families." Human Mutation. 2. 214-220 (1993)

Fukao T.,et al.：“两个原始家族线粒体乙酰乙酰辅酶 A 硫解酶缺陷的分子研究。”