細菌呼吸鎖末端オキシダーゼの変換機構:ヘム補欠分子族の入れ替えによる変換

细菌呼吸链末端氧化酶的转化机制：血红素辅基置换转化

• 批准号: 04266214
• 负责人: 松下 一信
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04266214/
• 关键词: Acetobacter aceti; 呼吸鎖末端オキシダーゼ; チトクロムa_1; チトクロムo

酢酸菌Acetobacter acetiの呼吸末端オキシダーゼは振盪培養によってチトクロムa_1を、静置培養によってそれがチトクロムoを生成する。しかも、そのチトクロムoが相互に非常に高い相同性を有し、同一のペプチドより成ることを示唆されている。そこで、本研究では、酢酸菌のこの特異な末端オキシダーゼの変換機構を解明するため、それら両オキシダーゼが単一の構造遺伝子から由来するのか、別々の構遺伝子から発現しているのか、さらに培養条件によるヘムaの変換が起るのか否かを解明することを目指した。1.両オキシダーゼが同一の構造遺伝子から発現するのか否かを調ベるために、まず大腸菌チトクロムoサブユニットIの塩基配列から推定される保存性の高い領域をプライマーとしてPCR法で酢酸菌末端オキシダーゼに対応するDNAフラグメントを調製した。このDNAをプローブとして、振盪培養及び静置培養した菌体から調製した染色体DNAを種々の制限酵素で処理し、ハイブリダイゼーションせ行ない、チトクロムa_1とチトクロムoが同一の構造遺伝子に由来することを示唆する結果を得た。2.静置培養ではヘムo、振盪培養ではヘムaが生成されるので、それぞれの生合成の調節機構を解明するため、各培養におけるヘム成分の発現と酸素分圧との関係を調ベた。その結果、酸素分圧が増加することで、両培養ともヘムoとヘムaの変換は起らなかったが、それらの量が大きく減少することが示された。それにともなって、酵素活性の大幅な減少もみられたが酵素蛋白の減少はさほど大きくなく、両オキシダーゼのヘム合成と蛋白合成は完全には協調していないことが示された。

The oxalic acid bacteria Acetobacter aceti

项目成果

K.Matsushita et al.: "Methanol and Ethanol Oxidase Respiratory Chains of the Methylotrophic Acetic Acid Bacterirm,Acetobacter methanolicus" Journal of Biochemistry. 111. 739-747 (1992)

K.Matsushita 等人：“甲基营养乙酸细菌、甲醇醋杆菌的甲醇和乙醇氧化酶呼吸链”生物化学杂志。

K.Matsushita et al.: "Change of the Terminal Oxidase from Cytochrome a1 in Shaking Cultures to Cytochrome o in Static Cultures of Acetobacter aceti" Journal of Bacteriology. 174. 122-129 (1992)

K.Matsushita 等人：“醋酸杆菌摇动培养物中末端氧化酶从细胞色素 a1 变为静态培养物中细胞色素 o 的变化”细菌学杂志。

K.Matsushita et al.: "Ethanol Oxidase Resperatory Chain of Acetic Acid Bacteria.Reactivety with Ubiquinone of Pyrroloquinoline Quinone-dependent Alcohol Dehydrogenases Purified from Acetobacter aceti and Gluconobacter suboxydans" Beoscience,Biotechnology

K.Matsushita 等人：“乙酸细菌的乙醇氧化酶呼吸链。从醋酸杆菌和低氧化葡糖杆菌中纯化的吡咯喹啉醌依赖性醇脱氢酶与泛醌的反应性” Beoscience、生物技术

K.Matsushita et al.: "Homology in the Structure and the Prosthetic Groups between Two Different Terminal Ubequinol Oxidases,Cytochrome a1 and Cytochrome o,of Acetobacter aceti" Journal of Biological Chemistry. 267. 24748-24753 (1992)

K.Matsushita 等人：“醋酸杆菌的两种不同末端乌苯醌氧化酶、细胞色素 a1 和细胞色素 o 的结构和辅基的同源性”《生物化学杂志》。