酢酸耐性機構の分子生物学的研究

醋酸耐受机制的分子生物学研究

• 批准号: 03F00766
• 负责人: 松下 一信
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F00766/
• 关键词: 酢酸耐性能; アルコール脱水素酵素; Gluconoacetobacter europaeus; Acetobacter aceti; 高度酢酸耐性酢酸菌; 細胞膜

酢酸菌はエタノールを酸化して酢酸を高濃度に培地中に蓄積する。そのため、他の細菌にみられない高い酢酸耐性能を有している。しかしながら、この酢酸耐性能は酢酸菌の菌株によっても大きく異なっており、特にヨーロッパで酢酸発酵に用いられているGluconoacetobacter europaeus(高度酢酸耐性菌)は15%もの高濃度の酢酸を蓄積する事ができるが、日本国内で用いられる酢酸菌Acetobacter aceti(中度酢酸耐性菌)は5-6%の酢酸しか蓄積することができない。本研究では、欧州の食酢産業で盛んに用いられている高度酢酸耐性菌とわが国で主に用いられている中度酢酸耐性菌の酢酸耐性機構を比較研究することで、酢酸菌の酢酸耐性機構とその機構に関与する遺伝子を明らかにするとともに、この酢酸耐性へのアルコール酸化反応に関与するアルコール脱水素酵素(ADH)機能の影響についても検討することを目的としている。これまでに、Janja Trcek博士は、いくつかの高度酢酸耐性菌の分子系統学的解析をすすめるとともに、それらの菌株の実験室培養条件、細胞膜調製条件、ADH活性測定条件を検討して、それらの条件の確立に成功した。現在は、さらにそれら高度酢酸耐性菌からのADHの分離精製をすすめているところである。それと並行して、松下は中度酢酸耐性菌におけるADH機能の解明をそれらの欠損変異株を用いることですすめるとともに、中度酢酸耐性菌におけるの酢酸耐性に関連する膜構造成分および細胞膜タンパク質成分の解析をすすめているところである。

The sorrel bacteria are acidified, the sorrel acid is high, and the soil is stored in the soil. The resistance to oxalic acid is higher than that of other bacteria in order to improve the acid tolerance. Oxalic acid tolerance, sorrel tolerance, sorrel acid tolerance, sorrel acid tolerance In Japan, 5-6% oxalic acid bacteria Acetobacter aceti (moderately oxalic acid tolerant bacteria) are used in Japan. In this study, food and entertainment facilities in Europe and Europe were used in food and entertainment industries. High acid-tolerant bacteria were used in food and entertainment industries in Europe. A comparative study was conducted on the mechanism of sorrel tolerance of moderate sorrel-tolerant bacteria and sorrel-tolerant bacteria. Acid tolerance, acid tolerance, acidification, anti-acidification and dehydrase enzyme (ADH) mechanism have an effect on acid tolerance, acid tolerance, acidification and dehydrase activity. Molecular phylogenetic analysis of highly oxalic acid-tolerant bacteria, including laboratory culture conditions, cell membrane conditions, ADH activity test conditions, successful conditions, and molecular systematics of highly oxalic acid-tolerant bacteria. At present, there is a high level of acid-tolerant bacteria, such as ADH, which is highly resistant to sulfuric acid. The membrane structure of moderate sorrel tolerant bacteria and Panasonic acid tolerant bacteria caused by the membrane structure of medium sorrel tolerant bacteria, Panasonic acid tolerant bacteria and Panasonic acid tolerant bacteria were used to analyze the components of cell membrane in the presence of moderate sorrel tolerant bacteria, Panasonic acid tolerant bacteria and Panasonic acid tolerant bacteria.

项目成果

Trcek, J., Trebar D.: "Gene encoding PQQ-dependent alcohol dehydrogenase : a phylogenetic marker and a target or species identification of acetic acid bacteria."for publication to International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. (Submitt

Trcek, J., Trebar D.：“编码 PQQ 依赖性乙醇脱氢酶的基因：醋酸菌的系统发育标记和目标或物种鉴定。”发表于《国际系统与进化微生物学杂志》。

K.Matsushita, H.Toyama, O.Adachi: "Respiratory Chains in Acetic Acid Bacteria : Membrane-bound Periplasmic Sugar and Alcohol Respirations"Respiration in Archaea and Bacteria. : Diversity of Prokaryotic Respiratory Systems (D.Zannoni ed.). Vol.2. (2004)

K.Matsushita、H.Toyama、O.Adachi：“乙酸细菌中的呼吸链：膜结合周质糖和酒精呼吸”古细菌和细菌中的呼吸。

P.Chinnawirotpisan, G Theeragool, S.Limtong, H.Toyama, O.Adachi, K.Matsushita: "Quinoprotein Alcohol Dehydrogenase Works for Catabolic Acetate Production, while NAD- dependent Alcohol Dehydrogenase Does for Ethanol Assimilation, in Acetobacter pasteurianu

P.Chinnawirotpisan、G Theeragool、S.Limtong、H.Toyama、O.Adachi、K.Matsushita：“在巴氏醋杆菌中，醌蛋白醇脱氢酶用于乙酸分解代谢生产，而 NAD 依赖性醇脱氢酶用于乙醇同化”

P.Chinnawirotpisan, K.Matsushita, H.Toyama, O.Adachi, S.Limtong, G Theeragool: "Purification and Characterization of Two NAD-dependent Alcohol Dehydrogenases (ADHs) Induced in the Quinoprotein ADH-Deficient Mutant of Acetobacter pasteurianus SKU1108"Biosc

P.Chinnawirotpisan、K.Matsushita、H.Toyama、O.Adachi、S.Limtong、G Theeragool：“巴氏醋杆菌 SKU1108 的奎宁蛋白 ADH 缺陷突变体中诱导的两种 NAD 依赖性乙醇脱氢酶 (ADH) 的纯化和表征”

Trcek, J., Matsushita, K., Toyama, H., Adachi, O., Trebar, D.: "Gene encoding PQQ-dependent alcohol dehydrogenase : a phylogenetic marker and target for species identification of acetic acid bacteria."1st FEMS Congress of European Microbiologists, Sloveni

Trcek, J.、Matsushita, K.、Toyama, H.、Adachi, O.、Trebar, D.：“编码 PQQ 依赖性乙醇脱氢酶的基因：醋酸菌物种鉴定的系统发育标记和目标。”1st FEMS