ゴルジ装置を中心とした選別輸送路の超微形態的研究

以高尔基体为中心的运输路线排序的超形态学研究

• 批准号: 05252231
• 负责人: 山科 正平
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05252231/
• 关键词: ゴルジ装置; オカダ酸; ブレフェルジンA; 耳下腺; 免疫組織化学; 選別輸送

ゴルジ装置への流入路とそこからの流出路における選別輸送機構を解明する目的で、ゴルジ装置の形態に変化を与える薬剤の作用下におけるゴルジの形態変動と輸送の実態を免疫電顕法の使用により精査し、以下の結果を得た。1.ゴルジ装置の構造と機能に与えるオカダ酸の作用:蛋白脱リン酸化の阻害剤であるオカダ酸で、ゴルジ装置は直ちに層板構造を失い、直径70nm程の空胞の集団に変わり、分泌顆粒の形成が停止した。また投与の中止で4時間までに層板構造が再構成されることが判明した。層板の崩壊や再形成の過程で、trans領域を認識するGT-1モノクロール抗体とamylase、或いはリソゾーム蛋白であるcathepsin D の免疫電顕により、不完全な層板から形成される分泌顆粒にはこれらの標識が一様に検出されることが判明した。またこれら標識が基底面へも放出されていた。正常な選別輸送の発現にはゴルジの層板構造の存在が前提となることを明らかにした。2.ゴルジ装置の構造と選別輸送機能に与えるブレフェルジン A (BFA)の作用BFAでゴルジは急速に退縮し、作用の中止で1時間までに層板構造を回復させる。層板構造の退縮と再構成の過程で上記と同様に免疫電顕を行うと、用いたいずれの標識も分泌顆粒に出現し、一部は自由表面ばかりではなく基底面からも分泌されていた。そのため層板が不完全な状態のゴルジでは、【.encircled1.】残留シグナルあるはその認識機構、【.encircled2.】targetingシグナル、【.encircled3.】輸送の方向性、に乱れがおきており、OAの結果と併せてこの現象は普遍的なものと認識することができる。3.ゴルジ層板の形態形成と微小管の関係BFAやOAからの回復期で層板構造が急速に再形成される時期に抗微小管剤を加えておくとゴルジ装置は退縮したままの状態にとどまり、層板の形成はおきなかった。これは層板構造の形成が微小管で調節されていることを意味しており、その詳細は今後分析したい。

ゴ ル ジ device へ の into road と そ こ か ら flow の way に お け る choose don't convey mechanism を interpret す る purpose で, ゴ ル ジ device に の form - the を and え る 薬 under the action of tonic の に お け る ゴ ル ジ の form - move と conveying の を immune 顕 method be state の use に よ り check し, the result of the following の を た. 1. ゴ ル ジ device の tectonic に と function and え る オ カ ダ acid の effect: protein リ off ン acidification の resistance against tonic で あ る オ カ ダ acid で, ゴ ル ジ device は straight ち に layer plate structure を い loss, diameter of 70 nm range の empty cell の set 団 に - わ り, secretory granules の form が stop し た. Youdaoplaceholder0 is thrown into また to stop で4 time までに layer plate construction が reformation される とが とが determination of た. Layer board の collapse 壊 や again formation の で, trans を know す る GT - 1 モ ノ ク ロ ー ル antibody と amylase, or い は リ ソ ゾ ー ム protein で あ る cathepsin D の immune electric 顕 に よ り, incomplete な layer board か ら form さ れ る secretory granules に は こ れ ら の logo が a others に 検 out さ れ る こ と が.at し た. Youdaoplaceholder0 た れら marks the が base surface へ へ releases されて されて た た. Normal な choose don't conveying の 発 now に は ゴ ル ジ の layer plate structure exist の が premise と な る こ と を Ming ら か に し た. 2. ゴ ル ジ に と choose don't conveying device の structure function and え る ブ レ フ ェ ル ジ ン A role (BFA) の BFA で ゴ ル ジ は に し shrinking rapidly, 1 time effect の suspended で ま で に layer plate structure を reply さ せ る. Layer plate structure の と shrinking process to constitute の で written と with others に immune electric 顕 を line う と, use い た い ず れ の logo も secretory granules appear に し, a は free surface ば か り で は な く basal surface か ら も secretion さ れ て い た. そ の た め layer board が incomplete state な の ゴ ル ジ で は, residual. Encircled1. 】 【 シ グ ナ ル あ る は そ の knowledge institutions, targeting. Encircled2. 】 【 シ グ ナ ル, conveying の. Encircled3. 】 【 directivity, に れ が お き て お り, OA の results と and せ て こ の The phenomenon is that the common な と と と と is recognized by する する とがで る る る る. 3. ゴ ル ジ layer board の morphogenetic と tiny tube の masato is BFA や OA か ら の reply period で layer plate structure が に rapidly to form さ れ る に tiny pipe resistance during the period of tonic を plus え て お く と ゴ ル ジ device は retreat し た ま ま の state に と ど ま り, layer board の formation は お き な か っ た. こ れ は layer plate structure の form tiny tube で が adjustment さ れ て い る こ と を mean し て お り, そ の は detailed analysis in the future し た い.

项目成果

H.Tamaki,S.Yamashina: "Improved method for post-embedding Cytochemistry" J.Histochem.Cytochem. (発売予定).

H.Tamaki、S.Yamashina：“嵌入后细胞化学的改进方法”J.Histochem.Cytochem（计划发布）。

S.Yamashina,H.Tamaki: "Effects of Okadaicaud on structure and function of golgiapparatus" Cell Struct.Funct. (発売予定).

S. Yamashina、H. Tamaki：“Okadaicaud 对高尔基装置结构和功能的影响”Cell Struct.Funct。

H.Tamaki,S.Yamashina: "Structural and functional reconstouction of golgi apparatus." J.Cell Bill.(発売予定).

H.Tamaki，S.Yamashina：“高尔基体的结构和功能重建。”J.Cell Bill。