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ゴルジ装置を中心とした選別輸送路の超微形態的研究

以高尔基体为中心的运输路线排序的超形态学研究

基本信息

批准号：
03264218
负责人：
山科正平
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.分泌機能とゴルジ装置の動態:ゴルジのtrans側の層板に局在する105KDの糖蛋白を認識する抗ゴルジモノクロ-ナル抗体を作製して、免疫電顕法によりブレフェルヂン(BFA)およびモネンシン(MN)処理下の耳下腺腺房細胞におけるゴルジ装置の動態を追跡した。BFAの作用によりRERにも同抗体が分布するようになった。これはERからGolgiへの輸送の停止に伴いGolgi成分がERへ逆流することを反映しているらしい。MN処理によりtrans Golgi networkから膨化が始まり、その領域にもこの抗体が局在することが判明した。2.再形成ゴルジ装置の電顕組識化学的解析:BFAを培養液から除去すると直ちにRERから輸送小胞ができ、これがrudimentary Golgiに融合して急速にゴルジ装置が回復する。回復期でGolgiの再形成過程をオスミウム浸漬法、TPPase組識化学法、モノクロ-ナル抗体による免疫染色で標識して追跡中である。3.輸送小胞のゴルジへの融合能電顕的検定:BFAからの回復期に液温を20℃にすると、輸送小胞の形成はおきても膜融合は停止してGolgi領域に輸送小胞の大集団が形成される。30℃では37℃に比して幾分遅滞するものの層板形成が進行する。この時抗微小管剤であるnocodazolを加えても層板形成が進行したため、微小管がゴルジの層板形成ではなく形態安定機構に作用しているものと推定した。その他の薬剤の効果も追跡中である。4.ゴルジtrans領域における選別輸送路の決定:器官培養下の顎下腺で、管腔側に分泌されるアミラ-ゼと基底側に分泌されて基底膜に組み込まれるインテグリンαー6の2重標識法を行いゴルジ装置における選別輸送路の解析が進行中である。これまでに光顕下の免疫組識化学には成功しているので、電顕レベルの解析が急がれている。

1. Secretion function and dynamics of the device: the recognition of the glycoprotein on the trans side of the plate, the production of anti-inflammatory antibodies, and the tracking of the dynamics of the device under the treatment of the auricular gland cells with the immunoelectric method (BFA) and the hormone (MN). The role of BFA in the distribution of antibodies The Golgi component of ER flow is reflected in the stop of ER flow. It was now clear that expansion could begin across the trans Golgi network in MN processing, and that these antibodies could be used in many fields. 2. Electrochemical analysis of the re-forming device:BFA culture solution removal, direct removal, transport of small cells, fusion of rudimentary Golgi, rapid recovery of the device. During the recovery period, Golgi re-formation was identified by immersion, TPPase histochemistry, and immunostaining. 3. Determination of fusion energy of transport cell:BFA recovery period, liquid temperature, transport cell formation, membrane fusion, Golgi domain, transport cell formation. At 30℃ and 37℃, the formation of the laminate proceeded with a slight delay. The formation of micro-tubes and micro-tubes and the formation of micro-tubes and micro-tubes and micro-tubes and He is also a member of the Board of Directors. 4. Determination of selective delivery pathway in the field of trans-mandibular gland: Submandibular gland, luminal secretion, basal secretion, basement membrane organization, α-6 two-fold labeling method Therefore, immunohistochemical chemistry under light has been successful, and the analysis of electronic proteins has become urgent.