Na^+/H^+アンチポーターとNa^+/H^+/基質シンポーターの共役系の解析

Na^+/H^+逆向转运蛋白与Na^+/H^+/底物同向转运蛋白耦合系统分析

• 批准号: 05259217
• 负责人: 土屋 友房
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05259217/
• 关键词: アンチポーター; シンポーター; 共役系

主として腸炎ビブリオと大腸菌を用い、Na^+/H^+アンチポーターの性質の生化学的解析と遺伝子面からの解析を行った。また腸炎ビブリオのNa^+/H^+/基質シンポーターについても同様に解析した。腸炎ビブリオの細胞膜には少なくとも二つのNa^+/H^+アンチポーターが存在し、一方はpH依存性、もう一方はpH非依存性であることがわかった。前者においてはNa^+が最もよい基質となること、Li^+も基質になること、しかしK^+は基質にはならないことが明らかになった。また、アミロライドによって強く阻害されることがわかった。その遺伝子をクローニングし、シーケンスを決定した。その結果、このアンチポーターは大腸菌のNhaA系とホモロジーが高いこと、動物細胞のアンチポーターとも部分的にホモロジーがあること、動物細胞のアンチポーターのアミロライド結合部位とされているドメインとはかなりよく似たシーケンスであること、その他のNa^+を輸送するタンパク質ともある程度ホモロジーがあることなどがわかった。さらに、腸炎ビブリオのアンチポーターは12個の膜貫通領域をもっていることが示唆された。このアンチポーター遺伝子を大腸菌のアンチポーター欠損株に導入すると、Na^+耐性とLi^+耐性が回復することがわかった。大腸菌のNa^+/H^+アンチポーターについても、Na^+耐性、Li^+耐性に大変重要であることがわかった。一方、腸炎ビブリオにおいて、すでに明らかにしたアデノシン輸送系の他に、グルコース輸送系の一つがNa^+およびH^+とのシンポート系であるらしいことがわかってきた。現在この系について生化学的面、遺伝子面からの解析を行っている。

Main と し て enteritis ビ ブ リ オ と coliform を い, Na + / H ^ ^ + ア ン チ ポ ー タ ー の nature の analytical と of biochemistry 伝 sub surface か ら の parsing line を っ た. ま た enteritis ビ ブ リ オ の Na + / H ^ ^ + / substrate シ ン ポ ー タ ー に つ い て も with others に parsing し た. Enteritis ビ ブ リ オ の membrane に は less な く と も two つ の Na + / H ^ ^ + ア ン チ ポ ー タ ー が し, one party は pH dependency, も う side は pH of dependency で あ る こ と が わ か っ た. The former に お い て は Na ^ + が most も よ い matrix と な る こ と, Li ^ + も matrix に な る こ と, し か し K ^ + は matrix に は な ら な い こ と が Ming ら か に な っ た. Youdaoplaceholder0, ア ロラ ロラ ドによって ドによって strong く hindrances される される とがわ った った った. そ の posthumous son 伝 を ク ロ ー ニ ン グ し, シ ー ケ ン ス を decided し た. そ の results, こ の ア ン チ ポ ー タ ー は coliform の NhaA department と ホ モ ロ ジ ー が high い こ と, animal cells の ア ン チ ポ ー タ ー と も part of に ホ モ ロ ジ ー が あ る こ と, animal cells の ア ン チ ポ ー タ ー の ア ミ ロ ラ イ ド combining site と さ れ て い る ド メ イ ン と は か な り よ く like た シ ー ケ ン ス で あ る こ と, そ の He の Na ^ + を conveying す る タ ン パ ク qualitative と も あ る degree ホ モ ロ ジ ー が あ る こ と な ど が わ か っ た. さ ら に, enteritis ビ ブ リ オ の ア ン チ ポ ー タ ー は 12 の transmembrane domain を も っ て い る こ と が in stopping さ れ た. こ の ア ン チ ポ ー タ ー posthumous son 伝 を coliform の ア ン チ ポ ー タ ー owe damage strain に import す る と, Na ^ + patience と Li ^ + patience reply が す る こ と が わ か っ た. Coliform の Na + / H ^ ^ + ア ン チ ポ ー タ ー に つ い て も, Na ^ + patience, Li ^ + patience に big - important で あ る こ と が わ か っ た. Side, enteritis ビ ブ リ オ に お い て, す で に Ming ら か に し た ア デ ノ シ ン conveying is の he に, グ ル コ ー ス transmission is の つ が Na ^ + お よ び H ^ + と の シ ン ポ ー ト department で あ る ら し い こ と が わ か っ て き た. Now, the <s:1> に is the surface and derivative 伝 subsurface of に, に and て in biochemistry. Youdaoplaceholder3 ら analysis of the を line って, る and る.

项目成果

Noriko Okazaki: "Characterization of the lactose transport system in Citrobacter frendii" Biological Pharmaceutical Bulletin. (印刷中). (1994)

Noriko Okazaki：“弗伦迪柠檬酸杆菌乳糖转运系统的特征”生物制药通报（1994 年）。

Teruo Kuroda: "Properties of the Na^+/H^+ antiporter of Vibrio parahaemolyticus" Journal of Biochemistry. (印刷中). (1994)

Teruo Kuroda：“副溶血弧菌的 Na^+/H^+ 逆向转运蛋白的特性”，生物化学杂志（1994 年出版）。

Kei Inaba: "Lithium toxicity and Na^+(Li^+)/H^+ antiporter in Escherichia coli" Biological Pharmaceutical Bulletin. 17. 395-398 (1994)

Kei Inaba：“大肠杆菌中的锂毒性和 Na^ (Li^ )/H^ 逆向转运蛋白”生物制药通报。