V-ATPase阻害剤による新規制癌機構と治療戦略

V-ATP酶抑制剂的新调控癌症机制和治疗策略

• 批准号: 11140226
• 负责人: 大熊 勝治
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140226/
• 关键词: バフィロマイシン; プロジギオシン; プロトンポンプ; アポトーシス; 突起進展; PC12; 細胞分化; H^+; Cl^-シンポーター

本研究では、V-ATPaseの選択的阻害剤であるバフィロマイシンと比較しつつ、H^+/Cl^-シンポーターであるプロジギオシン類のプロトン輸送阻害機構と細胞増殖阻害・細胞死誘導機構、癌抑制機構を明らかにし、ひいては理想的制癌剤の開発を目指した。その結果、(1)プロジギオシン類(タンビャミン類を含む)は、そのH^+/C1^-シンポート活性により各種プロトンポンプを脱共役するが、その活性発現には最低2個のピロール環の存在が必須であることが明らかになった。しかし、プロジギオシンより強力な新たなH^+/Cl^-シンポーターは見い出されなかった。(2)H^+/Cl^-シンポーターはリソソームのpHを上昇させ、細胞質のpHを低下させた。(3)しかし、細胞質pHの低下が細胞増殖抑制・細胞死の原因である可能性は、その作用が弱塩基で阻害されないことから否定的である。(4)バフィロマイシン同様、ブロジギオシン類も神経突起伸展(NOG)・アポトーシスを誘導するが、NOG誘導とアポトーシス誘導の情報伝達経路は両反応で異なっていることが判明した。即ち、両反応とも新たなRNA及び蛋白質合成を必要とし、K-252aやA-キナーゼ非依存性、MAPキナーゼ依存性であるが、セリン-スレオニンホスファターゼ、チロシンキナーゼ、チロシンホスファターゼに非依存性である点で、アポトーシス誘導はNOG誘導と異なっている。(5)細胞死は、カスパーゼ3/9の支配下にあり、ミトコンドリアからのシトクロームc放出を伴うことが明らかとなった。(6)バフィロマイシン結合蛋白質同定用のアフィニティープローブは作成の基本条件が確立され、ジアジリン誘導体の作成をするばかりとなった。(7)プロジギオシン類やそれ以外のH^+/Cl^-シンポーター類もヌードマウスに移植した膵癌細胞の増殖を抑制しアポトーシスを誘導した。(8)高度好熱菌V-ATPaseの再構成に成功し、ATP加水分解・プロトン輸送とATP合成との関係を明らかにした。

This study で は, V - ATPase の sentaku's resistance against tonic で あ る バ フ ィ ロ マ イ シ ン と compare し つ つ, H + / Cl ^ - ^ シ ン ポ ー タ ー で あ る プ ロ ジ ギ オ シ ン class の プ ロ ト ン conveying resistance against institutions と cells raised, colonization resistance against cell death, induction mechanism, cancer inhibition を Ming ら か に し, ひ い て は ideal tonic の open system carcinoma 発 を refers し Youdaoplaceholder0. そ の results, (1) プ ロ ジ ギ オ シ ン class (タ ン ビ ャ ミ ン class を む) は, そ の H + / C1 ^ - ^ シ ン ポ ー ト active に よ り various プ ロ ト ン ポ ン プ を す off a total service る が, そ の active 発 now に は minimum 2 の ピ ロ ー ル existence の が must で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. し か し, プ ロ ジ ギ オ シ ン よ り powerful new た な な H + / Cl ^ - ^ シ ン ポ ー タ ー は see い out さ れ な か っ た. (2) H + / Cl ^ - ^ シ ン ポ ー タ ー は リ ソ ソ ー ム の pH を rise さ せ, cytoplasmic の low pH を さ せ た. (3) し か し, low pH の が cell cytoplasm raised colonization, inhibit cell death, の reason で あ は る possibility, そ の role が weak salt base で resistance against さ れ な い こ と か ら negative で あ る. (4) バ フ ィ ロ マ イ シ ン with others, ブ ロ ジ ギ オ シ ン god 経 も protuberant stretch (NOG) ア ポ ト ー シ ス を induced す る が, induced NOG と ア ポ ト ー シ ス induction の intelligence 伝 for 経 road は struck against 応 で different な っ て い る こ と が.at し た. Namely ち, struck the 応 と も new た な RNA and び を protein synthesis necessary と し, K - 252 - A や A - キ ナ ー ゼ dependency, MAP キ ナ ー ゼ dependency で あ る が, セ リ ン - ス レ オ ニ ン ホ ス フ ァ タ ー ゼ, チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ, チ ロ シ ン ホ ス フ ァ タ ー ゼ に non dependency で あ る で, ア ポ ト ー シ ス induced は NOG Induce と different なって る る. (5) cell death は, カ ス パ ー ゼ 3/9 の domination に あ り, ミ ト コ ン ド リ ア か ら の シ ト ク ロ ー ム c release を with う こ と が Ming ら か と な っ た. (6) バ フ ィ ロ マ イ シ ン binding protein with fixed の ア フ ィ ニ テ ィ ー プ ロ ー ブ は made の が establish basic conditions さ れ, ジ ア ジ リ ン inductor の made を す る ば か り と な っ た. (7) プ ロ ジ ギ オ シ ン class や そ れ outside の H + / Cl ^ - ^ シ ン ポ ー タ ー class も ヌ ー ド マ ウ ス に transplantation し た Cui cancer の raised colonization を inhibit し ア ポ ト ー シ ス を induced し た. (8) highly hot bacteria V - ATPase の constitute に し success again, ATP hydrolysis プ ロ ト ン conveying と ATP synthesis と の masato を and Ming ら か に し た.

项目成果

Hajime Ohtani: "Potential Role of Vacuolar H+-ATPase in Neointimal Formation in Cultured Human Saphenous Vein"J. Thorac. Cardiovasc. Sur.. (in press). (2000)

Hajime Ohtani：“液泡 H -ATP 酶在培养的人隐静脉新内膜形成中的潜在作用”J。

大熊 勝治: "細胞生物学実験法 1.細胞培養法"廣川書店. 154 (1999)

大隈胜晴：“细胞生物学实验方法1.细胞培养方法”广川书店154（1999）。

Tetsuo Ohta: "Activated lansoprazole inhibits cancer cell adhesion to extracellular matrix components."Intern.J.Oncol.. 15(1). 33-39 (1999)

Tetsuo Ohta：“活化的兰索拉唑抑制癌细胞与细胞外基质成分的粘附。”Intern.J.Oncol.. 15(1)。

Ken Yokoyama: "V-type ATPase/synthase from Thermus thermophilus,subunit structure and operon"J. Biol.Chem.. in press. (2000)

Ken Yokoyama：“来自嗜热栖热菌的 V 型 ATP 酶/合酶、亚基结构和操纵子”J。