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ウイルス増殖における宿主細胞骨格系の関与について

宿主细胞骨架系统参与病毒增殖

基本信息

批准号：
05264203
负责人：
河合明彦
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

狂犬病の成熟ウイルス粒子内には5種類のウイルスタンパク質以外に,種々の細胞成分(小さい方から,22K42K,73K,75K,82K,85K,100K,130-140K,および250K)が含まれており、そのうちの42Kのものは細胞骨格系の重要な成分即ちアクチンであることが以前に明らかにされている。本研究では、このアクチンを含めた細胞骨格系がウィルス増殖過程において重要な働きをするという立場に立ってウイルス粒子中の細胞骨格成分あるいは関連する細胞成分の同定及び局在部位を明らかにした。まず、75K、82Kおよび85Kのポリペプチドは分子量や抗原性からアクチン線維の末端に結合することが知られているエズリン,ラディキシンおよびモエジンであることがわかった。次にそのほかのものの同立を行なう作業を開始した。まずこれらの成分を認識するモノクローナル抗体を作成した(その戦術として,宿主細胞であるBML-21細胞成分を抗原としてラットを免疫した後,脾細胞を取り出してハイブリドーマを作成し、次に狂犬病ウイルスを抗原としてスクリーニングを行ない,ウイルス粒子中の宿主成分を認識する抗体を選び出した)。次にBH4-21細胞のmRNAからcDNAライブラリーを作成し,これらの抗体と反応する抗原物質をコードしているcDNAクローンを分離し,塩基配列の決定を行なった。その結果、130-140Kのポリペプチドは既にCD44分子として報告されているものと同一であることがわかったが、そのほかに重要な発見として、この分子がERMタンパク質を介してアクチン線維を細胞腔に結合させる分子の実体であることを明らかにできた。またこの分子はウイルス粒子の特定の部位(頭部及び尾部)に局在しており、ウイルス粒子形成にアクチン線維が重要な役割を果していることを示唆するものである。また同様の方法で得られた抗体により、22K及び100Kのポリペプチドはやはり細胞腔に近い部位に存在する分子であり、ウイルスエンベロープ形成とのかかわりあいを示唆している。これらの分子は遺伝子のオモロジー検索から未報告のものであり、その実体の解明はこれからの課題である。また250Kのポリペプチドは分子量や抗原性からファイブネクチンであることがわかった。その役割についても今後の研究課題である。

Rabies mature virus particles contain five kinds of cell components except for the cytoplasm, and the cell components of the species (22 K 42 K,73K,75K,82K, 85K,100K,130-140K, and 250K) contain important components of the cell skeleton system, namely, the cell components of the cell skeleton at 42K. In this study, the identity and location of cellular components in the cytoskeleton system, including cytoskeleton components in the process of proliferation, were established. 75K, 82K, and 85K, respectively. The molecular weight and immunogenicity of the antibody are determined by the combination of the terminal end of the antibody and the terminal end of the antibody. The next step is to start working together. In addition, after immunization with BML-21 cell component antigen, spleen cells were extracted from the host cells. In addition, rabies cell component antigen was extracted from the spleen cells. In addition, antibodies against BML-21 cell component antigen were selected. The mRNA and cDNA fragments of BH4 -21 cells were prepared, and the cDNA fragments of the antibody and antigen were isolated and determined. As a result, the 130-140K molecular diversity of CD44 molecules is reported to be the same as that of the molecular diversity of ERM molecules. The molecular structure of the particle is composed of specific parts (head and tail), which play an important role in particle formation. The same method was used to determine the presence of molecules in the vicinity of the cell cavity at 22K and 100K. This is the first time that a person has ever been involved in a crime. 250K anti-virus antibody Future research topics will be discussed.