ホヤ胚発生過程における割球の発生運命決定機構の解析

海鞘胚胎发育过程中卵裂球发育命运决定机制分析

• 批准号: 05277203
• 负责人: 西田 宏記
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05277203/
• 关键词: 原索動物; ホヤ胚発生; 発生運命; 組織決定因子; 胚誘導

本年度は、マボヤにおける脊索分化の仕組みを顕微操作法を用いて解析すると共に、眼点-平衡器等価群における側方抑制シグナルのcDNAをクローニングすることを試みた。(1)脊索分化の仕組み脊索の分化には誘導が必要であり、その誘導源は植物半球に存在する割球(予定内胚葉割球と予定脊索割球自身)であることが結論された。ホヤ卵は古くからモザイク卵と考えられてきた。しかし、脊椎動物と同様、その起源と考えられている原索動物においても脊索は誘導によって形成されることが示された。脊索分化のメカニズムは脊索動物を通じて共通であることが判明した。(2)眼点-平衡器等価群におけるシグナルレセプターのクローニング側方抑制シグナルのレセプター遺伝子として、線虫C.elegansではlin-12、DrosophraではNotchが単離されている。すでにクローニングされている他種のlin/Notchファミリーのアミノ酸配列から、lin/Notchリピート内部で保存されている部分に対するオリゴヌクレオチドを作製し、これをプライマーにしてRT-PCRを行なった。その結果、神経胚mRNAからNotchホモログと思われるcDNA断片を増幅することに成功した。得られたアミノ酸配列はXenopusのXotch遺伝子に最も相同性が高かった。ノザンハイブリダイゼーションの結果から、NotchホモログのmRNAは長さが約9kbであることがわかった。予備的な実験では、未受精卵に母性mRNAが存在し、原腸胚、神経胚を経て、尾芽胚期以降はmRNAは減少していくことが示された。

This year, the notochord differentiation group has adopted the method of micro-manipulation in order to suppress the performance of the notochordal differentiation group by using the method of micro-manipulation, such as the parsing of the notochord, the eye point-balancer, and so on. This year, the cDNA has been tested. The main results are as follows: (1) in the notochord differentiation group, the notochord differentiation leads to the existence of a notochord cutting ball in the plant hemisphere of the plant hemisphere. I don't know if there are any eggs in the world. The animals of the spine are the same, the origin of the spinal cord is the same, and the origin of the spinal cord is the same. Notochord differentiation, notochord animal, notochord, notochord, notoch (2) Eye point-balancer and other groups of people, such as eye point, balancer, and so on, are responsible for the suppression of C.elegans, worm, Notch, Notch, and so on. This means that other types of lin/Notch can be used in the system, and that in the lin/Notch system, the internal storage system will be saved. In this case, you will need to pay attention to the operation of the system, and to the RT-PCR system. The result of the experiment showed that the embryo mRNA had a good response to Notch and thought that the cDNA fragment was successful. It is necessary to arrange the most identical and high-grade acid in the column of "Xenopus" and "Xotch". The results show that there is a significant difference between the results and the results of the mRNA test. The results show that the Notch does not have a significant impact on the mRNA. The maternal mRNA of the unfertilized egg, the proembryo, the divine embryo, and the tail bud stage of the unfertilized egg are in order to reduce the number of mRNA embryos.

项目成果

Hiroki Nishida: "Localization of egg cytoplasm,that promotes differentiation to epidermis in embryos of ascidian Halocynthia roretzi" Development. 120(印刷中). (1994)

Hiroki Nishida：“卵细胞质的定位，促进海鞘类 Halocynthia roretzi 胚胎的分化”120（出版中）。

Hiroki Nishida: "Localized regions of egg cytoplasm that promote expression of endoderm-specific alkaline phosphatase in embryos of ascidian Halocynthia roretzi" Development. 118. 1-7 (1993)

Hiroki Nishida：“卵细胞质的局部区域促进海鞘类 Halocynthia roretzi 胚胎中内胚层特异性碱性磷酸酶的表达”。