ホヤ胚発生過程における割球の発生運命決定機構の解析

海鞘胚胎发育过程中卵裂球发育命运决定机制分析

• 批准号: 07262202
• 负责人: 西田 宏記
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07262202/
• 关键词: 原索動物; ホヤ; 胚発生; 発生運命; 細胞質内決定因子; 誘導; 組織分化

初期発生過程において、各割球がどの組織を作る細胞になるのかを決定するしくみを解明するのが本研究の目的である。材料としては、研究上の利点に富んでいる原索動物(ホヤ)を用いた。本年度は、卵細胞質内組織決定因子によって決定がなされている内胚葉に関して、分子レベルでその決定機構を解明するべく解析を行った。(1)内胚葉特異的アルカリフォスファターゼの発現マボヤの孵化幼生を用いアルカリフォスファターゼの組織化学染色を行うと、内胚葉細胞にのみ強い活性が検出される。一方、発生過程を通してアルカリフォスファターゼの活性を検出すると、その活性は尾芽胚(受精後19時間)から現れ始めることがわっかた。転写阻害剤(アクチノマイシンD)と、翻訳阻害剤(ピューロマイシン)に対する感受性期より、アルカリフォスファターゼ遺伝子の転写は原腸胚期にはじまり、翻訳は尾芽胚期から起こり、翻訳が行われると同時に酵素活性が現れることが示唆された。(2)内胚葉特異的アルカリフォスファターゼの精製及びcDNAクローニングまず幼生の膜タンパク画分から、種々のカラムワーク及び電気泳動を用いて内胚葉特異的アルカリフォスファターゼ蛋白質の精製を行った。極微量のタンパクが精製されたが、それを用いてN末のアミノ酸配列を20アミノ酸決定した。この情報をもとにPCRとcDNAライブラリーのスクリーニングを行い、ほぼ全長を含むcDNAクローンを得た。現在、このcDNAを用い発現解析を進めている。

In the early stage, the students went through the process, and all the cutting organizations made a decision to understand the purpose of this study. The material is used in the material, and the material is used in the research. This year, the tissue determining factors in oocytes and oocytes determine that the endodermis of the ovary and the endodermis of the ovary will be determined, and the molecular marker will be used to analyze the results. The main results are as follows: (1) the characteristics of endodermis were observed in the incubation of young babies by means of tissue chemical staining. On the one hand, through the process of incubation, the active embryos of tail buds (19 hours after fertilization) and the active embryos (19 hours after fertilization). Write the block block, turn the block block, read the receptive phase, read the original embryo stage, flip the tail germ stage, and flip the tail germ stage to show that the enzyme activity is the same. (2) Endoderm-specific equipment is used in the production of infant membranes and cDNA-based electrophoretic electrophoretic equipment. Trace amounts of acid were used to determine the concentration of acid in the solution. If you want to PCR the cDNA, you will have to pay attention to the full length of the company, including the cDNA. At present, the analysis of the cDNA system is in progress.

项目成果

Yuki Nakatani: "Basic fibroblast growth factor induces notochord formation and the expression of As-T,a brachyury homolog, during ascidian embryogenesis" Development. (印刷中). (1996)

Yuki Nakatani：“在海鞘胚胎发生过程中，碱性成纤维细胞生长因子诱导脊索形成和 As-T（一种短链同源物）的表达”（出版中）。

西田宏記: "ホヤ胚発生における発生運命の決定機構" 蛋白質核酸酵素. 40. 114-125 (1995)

Hiroki Nishida：“海鞘胚胎发育中发育命运的决定机制”蛋白质核酸酶。 40. 114-125 (1995)

Hiroki Nishida: "Vegetal egg cytoplasm promotes gastrulation and is responsible for specification of regetal blastomeres in embryos of the ascidian Halocynthia roretzi" Development. (印刷中). (1996)

Hiroki Nishida：“植物卵细胞质促进原肠胚形成，并负责海鞘类 Halocynthia roretzi 胚胎的发育（正在出版）。

Noriyuki Satoh: "Morphogenetic determinants in the early ascidian embryo." BioEssays. (印刷中). (1996)

Noriyuki Satoh：“早期海鞘胚胎的形态发生决定因素”（BioEssays）（1996 年）。

Hiroki Nishida: "Determination at the last cell cycle before fate restriction." Zoological Science. 13. 15-20 (1996)

Hiroki Nishida：“命运限制前最后一个细胞周期的测定。”