転写基本因子群及び相互作用因子群の持つ新しい構造モティーフの三次構造解析

基本转录因子和相互作用因子新结构基序的三级结构分析

• 批准号: 09249203
• 负责人: 葛原 隆
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09249203/
• 关键词: TFIID; CCG1; 転写因子間相互作用; two‐hydrid法; 転写基本因子; 転写調節; 三次構造解析; 構造ドメイン

転写基本因子群が多様な転写調節因子群に相互作用し、転写調節反応に関わっていくためには、これらが特徴的な構造を有していることが必要である。そこで、転写基本因子群の機能の基盤になる分子構造を三次元レベルで解析するために、それらが有する特徴的な構造を一次構造から見い出し、転写調節における分子間相互作用の特異性を理解し、転写調節における転写基本因子群の機能的役割を明らかにすることを目的として解析を進めた。1)新しいタイプのクロマチン転写因子群の単離TATAボックス結合因子TFIIDや転写基本因子群と相互作用する新しいタイプのクロマチン転写因子群を単離することを目的に蛋白質-蛋白質間相互作用活性を利用するtwo‐hybrid法や蛋白質クロマトグラフィー法を用いた。TFIIDサブユニットや転写基本因子群の様々な構造ドメインに相互作用する因子を単離し、その結合特異性、細胞内在局性、発現分布、転写活性化能などに解析した。その中には細胞周期やシグナル情報伝達システムに関わる因子、更にヒストンアセチルトランスフェラーゼ活性あるいはクロマチン構造変換活性を有する新しい因子などを含む数多くの未知因子が含まれていた。2)単離したクロマチン転写因子群の構造解析用大量調整法の確立と結晶化これらの因子群の構造-活性相関の解析を三次元レベルで行うために大腸菌発現系で大量発現させ、精製することを試みた。様々な因子について大量調整法の確立を行い、結晶化条件の検討を加えている。

Planning to write basic factor group of others が な planning write regulatory factor に group interaction し, planning to write the 応 に masato わ っ て い く た め に は, こ れ ら が な structure of 徴 を have し て い る こ と が necessary で あ る. そ こ で, planning to write basic factor groups の function の base plate に な る molecular structure を three-d レ ベ ル で parsing す る た め に, そ れ ら が have す る な structure of 徴 を a tectonic か ら see い し, planning to write adjust に お け る intermolecular interactions の specificity を understand し, planning to write regulating に お け る planning to write the basic factors of cutting を Ming ら の function of service か に す る こ と を Objective: と て parse を enter めた. 1) new し い タ イ プ の ク ロ マ チ ン planning factor group of の 単 from TATA ボ ッ ク ス combination factor TFIID や planning to write basic factor と group interaction す る new し い タ イ プ の ク ロ マ チ ン planning factor group of を 単 from す る こ と を purpose に protein - protein interaction between active を using す る two ‐ hybrid method や protein ク ロ マ ト The グラフィ グラフィ method を uses グラフィ た. TFIID サ ブ ユ ニ ッ ト や planning to write the basic factor of の others 々 な tectonic ド メ イ ン に interaction す る factor を 単 し, そ の specificity, cell inner bureau, 発 distribution, planning now can write activeness な ど に parsing し た. In そ の に は cell cycle や シ グ ナ ル intelligence 伝 da シ ス テ ム に masato わ る factor, more に ヒ ス ト ン ア セ チ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ active あ る い は ク ロ マ チ ン structure variations in activity を す る new し い factor な ど を む count more く の contains unknown factor が ま れ て い た. 2) 単 from し た ク ロ マ チ ン planning factor group of の structure with a lot of control の establish と crystallization こ れ ら の factor group is の structure - activity masato の parsing を three-d レ ベ ル で line う た め に coliform 発 now is で large 発 now さ せ, refined す る こ と を try み た. The 々な factor に 々な て て て て the large-scale adjustment method <e:1> establishes the を rows <e:1> and the crystallization conditions <e:1> 検 seek を plus えて る る る.

项目成果

T.Yamamoto et al.: "Novel substrate specificity of the histone acetyltransferase activity of HIV-1 Tat-interactive protein Tip60" J.Biol.Chem.272. 30595-30598 (1997)

T.Yamamoto 等人：“HIV-1 Tat 相互作用蛋白 Tip60 的组蛋白乙酰转移酶活性的新底物特异性”J.Biol.Chem.272。

J.Nishikawa,et al.: "Drosophila TAF_<II>230 and thetranscriptional activator VP16 bind competitively to the TATA box-binding domain of the TATA box-binding protein" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.94. 85-90 (1997)

J.Nishikawa等人：“果蝇TAF_<II>230和转录激活剂VP16竞争性地结合到TATA盒结合蛋白的TATA盒结合结构域”Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.94。

Y.Tao,et al.: "Specific interactions and potential functions of human TAF_<II>100" J.Biol.Chem.272. 6714-6721 (1997)

Y.Tao 等人：“人类 TAF_<II>100 的特定相互作用和潜在功能”J.Biol.Chem.272。

M.Bando et al.: "The involvement of the histone fold motifs in the mutual interaction between human TAF_<II>80 and TAF_<II>22 between human TAF_<II>80 and TAF_<II>22" J.Biochem.121. 591-597 (1997)

M.Bando 等人：“组蛋白折叠基序参与人 TAF_<II>80 和 TAF_<II>22 之间的相互作用”J.Biochem。

T.Yamamoto,et al.: "Molecular genetic elucidation of the tripartite structure of the Schizosaccharomyces pombe 72 kDa TFIID subunit which contains a WD40 structural motif" Genes Cells. 2. 245-254 (1997)

T.Yamamoto 等人：“含有 WD40 结构基序的粟酒裂殖酵母 72 kDa TFIID 亚基三重结构的分子遗传学阐明”Genes Cells。