核内加水分解酵素CIBの機能解析

核水解酶CIB的功能分析

• 批准号: 13878120
• 负责人: 葛原 隆
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13878120/
• 关键词: TFIID; 転写活性化; ヒストン; CIB; クロマチン; ヌクレオソーム; 加水分解酵素; 構造解析

クロマチン構造変換反応に関与する様々なタイプのクロマチン構造変換因子の構造解析を通して、クロマチンを介した機能変換反応の素過程を明らかにする。本萌芽的研究では、新規核内加水分解酵素の機能解析及び構造解析を進めた。TATAボックス結合因子TFIIDの相互作用因子として単離したCIB(CCG1 interacting factorB)の一次構造を基に進化的な比較検討を行ったところ、原核細胞に存在する様々なタイプの加水分解酵素群と極めて弱いながらも相同性を有する複数の領域が分断して現れることが明らかになった。実際にCIBが加水分解酵素活性を有することも明らかにした。そこで、CIBの機能解析を進める一方で、三次構造解析を進めた。大腸菌で大量発現させ精製を進め、結晶を得た後、X線解析により三次構造での解像能をまず2.8Aレベルで、次に1.8Aレベルで明らかにするに至った。その結果、CIBは原核生物の加水分解酵素に見られるα/βフオールドを有する三次構造を持ち、酵素活性予想部位としてcatalytic triadを形成している3アミノ酸残基が見出された。また、CIBは転写活性化能を持つことから、加水分解酵素活性と転写活性化能との関係を明らかにする実験を進めている。

The structural analysis of the structural transformation factor is clear. This budding research will advance the functional analysis and structural analysis of hydrolytic enzymes in new nuclei. TATA binding factor TFIID interaction factor is isolated from CIB(CCG1 interacting factorB), and the primary structure of CIB evolution is compared with that of the prokaryotic cell. CIB activity is very high. The analysis of CIB function is advanced. The analysis of three structures is advanced. Coliform bacteria are found in large quantities, refined, crystallized, X-ray analyzed, and the resolution energy of the tertiary structure is 2.8A, 1.8A, and 1.8A. As a result, CIB has three structural residues in the prokaryote hydrolytic enzyme, namely α/β, β-, α-, β- The relationship between the activity of hydrolytic enzymes and the activity of metabolic enzymes is discussed.

项目成果

B.Padmanabhan et al.: "Crystallization of human CCG1-interacting factor B (CIB)"J. Crystal Growth. 232. 326-329 (2001)

B.Padmanabhan 等人：“人 CCG1 相互作用因子 B (CIB) 的结晶”J。