ウイルスの組織間移行からみた維管束系組織の解剖

点击翻译按钮获取中文摘要

TMVの移行タンパク質(MP)をGFPとの融合タンパク質として発現し、細胞間移行能を保持しているLQwt: Gfusウイルスを作成した。GFPの蛍光により機能する細胞内でのMPの動向を追跡することが出来るようになった。TMV感染プロトプラストでは感染後6時間で蛍光が点状に細胞質内に散在している(punctate/dots)。感染後18時間もすると大きな集塊を形成し(irregular body)、蛍光が細胞骨格(filaments)の上にも移行していく。この経時変化はウイルス感染組織でも観察された。合成されたMPは近傍で合成される子孫ウイルスの遺伝子RNAを結合した形で、細胞質内で結集したうえで細胞骨格を経由してスライド移動し、原形質連絡へと移行するというモデルが考えられた。MPのリン酸化に関する種々のdefective変異体はこのMPの移動過程の途中で止まっている像が観察された。細胞間移行から組織間移行へと推移する段階でのMP所在を師管と道管の関係とあわせて観察すると、維管束の組織に沿って、蛍光が細胞の表面に点在しており、原形質連絡(plasmodesmata)に存在する様子がみえる。LQwt: Gfus感染をトマト(本来の宿主植物)のプロトプラストでおこなうと、感染18時間ごろに多く、細胞表面から非常に細長いひげのような管状の構造(tubular structure)が現れることが見いだされた。現在、蛍光顕微鏡観察と電子顕微鏡観察によって、長さは10‐20μm、直径30‐50nmほどのものであることが確認された。所々で結び目のような構造が電子顕微鏡観察によってみられ、これは蛍光顕微鏡下では節のようにみえる。ブタ脳より調製した精製チューブリンやウサギから調製したアクチンと大腸菌で発現させたMPのin vitroでの相互作用の検討をはじめた。