原形質連絡の構成成分の検索と新たな機能解析系の開発

胞间连丝成分的寻找及新功能分析系统的开发

• 批准号: 11874118
• 负责人: 飯 哲夫
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11874118/
• 关键词: 原形質連絡; 細胞間移行; 植物ウイルス; 移行タンパク

パーティクルガン法により未知のタンパクと細胞質局在のGFPを植物表皮細胞で共発現させ、1日後のGFP拡がりを検出することにより、未知のタンパクの原形質連絡の透過性を上昇させる能力を評価しうることを明らかにした。従来からその能力の知られていたタバコモザイクウイルス(TMV)の30Kタンパク、トウモロコシのKN1などは、約50-60%の導入部位でGFPの拡散を誘導した。ジャガイモXウイルス(PVX)のコードするタンパクについて調べた結果、12Kタンパクに原形質連絡の排除分子量限界を上昇させる能力のあることが分かった。この手法は、従来のマイクロインジェクション法に比べ、より信頼性が高く且つ簡便であり、応用性も高い。感染性DNAを用いた相補実験の結果から、PVXの細胞間移行には3種の移行タンパクのうち25Kタンパク、12Kタンパクの発現は必須であるが、8Kタンパクは12Kタンパクの機能を補助するものであり、その発現は必要不可欠ではないことが分かった。また、PVXの細胞間移行が膜小胞あるいは細胞膜を介す可能性が考えられた。これは従来の考えからは除外されているものである。さらに、PVXの場合も、TMVと同様、複製と移行の間には何らかの関連があると予想された。ところが、キュウリモザイクウイルスのコードする細胞間移行機能は、TMVとPVXの移行能欠損変異株の細胞間移行をともに相補することができた。この結果は、これらの異なる移行タンパクの機能の比較的解析が今後の研究において重要であることを意味する。

The ability to increase the permeability of protoplasmic connections between plant epidermis cells and GFP cells after 1 day was evaluated. The ability to detect the presence of GFP in about 50-60% of the introduced sites was induced by 30K of the TMV. The results of the adjustment of the molecular weight limit of PVX and the ability to increase the molecular weight limit of 12K mass contact are as follows: This method is more reliable and simple than the previous method. The results of complementary studies on infectious DNA use show that PVX has three kinds of migration patterns: 25K and 12K. The occurrence of PVX is necessary, 8K and 12K. The function of PVX is complementary, and the occurrence of PVX is necessary. A study of the possibility of cellular migration of PVXこれは従来の考えからは除外されているものである。In the case of PVX, TMV is the same, and in the case of replication, it is the same. The cell migration function of TMV and PVX is complementary to the cell migration function of PVX. The results are important for future research.

项目成果

T.Yamanaka et al.: "TOM1, an Arabidopsis gene required for efficient multiplication of a tobamovirus, encodes a putative transmembrane protein."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97. 10107-10112 (2000)

T.Yamanaka 等人：“TOM1 是烟草花叶病毒有效增殖所需的拟南芥基因，编码推定的跨膜蛋白。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

A.Tamai and T.Meshi: "Tobamoviral movement protein transiently expressed in a single epidermal cell functions beyond multiple plasmodesmata and spreads multicellularly in an infection - coupled"Mol.Plant - Microbe Intract.. 14. 126-134 (2001)

A.Tamai 和 T.Meshi：“在单个表皮细胞中瞬时表达的烟草花叶病毒运动蛋白在多个胞间连丝之外发挥作用，并在感染中以多细胞方式传播 - 耦合”Mol.Plant - Microbe Intract.. 14. 126-134 (2001)