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マラリア媒介蚊の非媒介化に必要な遺伝子の解析と体液細胞種の同定

对传播疟疾的蚊子不传播所需的基因分析和体液细胞类型鉴定

基本信息

批准号：
09270206
负责人：
小林綾子
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ハマダラ蚊の生体防御機構からの原虫の回避機構を明らかにすることが「マラリア媒介蚊の非媒介化」の実現には不可欠である。現在、幾つかの非媒介変異体が報告されているが、その原因遺伝子はまだ同定されていない。一方で、昆虫の生体防御系が原虫にも有効である可能性が指摘され始めているが、その分子的なつながりは未明である。このような状況において(1)分子遺伝学的解析を可能とする非致死性の遺伝マーカーやトランスポソン(2)原虫の認識や排除に関わる蛋白やその抗体などを得ることが重要と考え、以下の研究を行った。(1)複眼におけるUV受容体の形成に働く遺伝子sevenlessをdominant positiveに発現させたショウジョウバエでは複眼表面の形態が変化する。蚊の光受容体構造は形態的にはハエと同じであるので、sevenless遺伝子が蚊において存在し、同等の機能を示すならば、形態マーカーに応用できると考えた。マラリア媒介種Anopheles gambiaeよりゲノムおよびcDNAライブラリーを作成し、複眼形成に関わる遺伝子sevenlessのホモログの同定、単離を行った。塩基配列及び予想アミノ酸配列の解析を行ったところ、チロシンキナーゼ領域の11のサブ領域で、キナーゼファミリーに保存されるすべてのアミノ酸がショウジョウバエと一致した。更に、この遺伝子の蚊における発現を解析した結果、幼虫における脳半球の分裂領域及び付近の上皮組織、更蛹では分化しつつある複眼にシグナルが検出され、複眼の形態形成の初期にこの遺伝子が発現していると考えられた。(2)昆虫体液細胞の分類および自己非自己の認識・排除に関わる分子の同定に向けて、センチニクバエ体液細胞表面へのモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマの作成した。顆粒細胞に対するモノクローナル抗体に関しては抗体産生細胞をクローニングした。

The biological defense mechanism of mosquitoes and protozoan avoidance mechanism should be clearly defined. Now, how many non-media variants are reported, and why are they transmitted? On the one hand, the biological defense system of insects has the possibility of being criticized, and the molecular nature of insects is unclear. (1) Molecular genetic analysis of non-lethal genes;(2) Protozoa recognition, exclusion, protein and antibody detection;(3) The following research is carried out. (1)The formation of compound UV receptors is characterized by a seven-dominant positive and a morphologic change in the surface of the compound. A study of the structure and morphology of photoreceptors Anopheles gambiae is a kind of vector that can be used to make and form compound eyes. The analysis of the base alignment and the expected alignment of the base acid is carried out in 11 different areas of the base alignment and the expected alignment of the base acid. In addition, the development of these genes is analyzed as a result, the division of the hemisphere and the epithelial tissue near the larva, the differentiation of the pupa, the development of the compound eye, and the early development of the compound eye. (2)The classification of insect body fluid cells and the identification of molecules involved in their identification, identification Granulosa cells are responsible for the production of monoclonal antibodies and antibody-producing cells.