マラリア媒介蚊の非媒介化に関する研究

疟疾媒介蚊非媒介化研究

• 批准号: 10166207
• 负责人: 小林 綾子
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10166207/
• 关键词: マラリア原虫; ハマダラ蚊; 昆虫生体防御

「マラリア媒介蚊の非媒介化」の実現に向けて、ハマダラ蚊の生体防御からの原虫の回避機構を明らかにすることを目的として昆虫の原虫に対する生体防御機構を解析した。今年度は、(1) 肝培養細胞へのマウスマラリア原虫スポロゾイト侵入系を確立した。原虫の侵入は培養3時間でも検出可能であった。原虫表面抗原に対する抗体で感染肝細胞数は抗体未処理に比べ1%〜5%へと顕著に減少した。原虫侵入細胞数は一回の実験でのばらつきはほとんどないが、用いる原虫感染蚊の感染後の日数や感染率に依存し、およそ百から数千の間で変動した。問題点(感染率の安定性、原虫を蚊体内より取り出す時間の制限などによる多サンプルを同時に扱う困難さ)はあるものの、今後この侵入系を用いて、目標とする昆虫由来物質の抗原虫活性を検索していくことが可能となった。(2) 新たな視点からの昆虫の異物認識機構の解明に向けて、変態期に見られる体液細胞の機能に着目した。変態期には不要な幼虫細胞が蛹化後の体液細胞により排除されるが、その分子機構は解明されていない。異物の認識・排除に関与する候補因子として、新たな蛹体液細胞膜表面抗原120蛋白を同定した。蛹の体液細胞は幼虫時に比べ貧食能が増大するが、この蛋白に対するモノクローナル抗体はこの増大する貧食活性を阻害した。抗体アフィニティカラムにより精製した120蛋白の部分アミノ酸配列の情報をもとにcDNA cloningを行った結果、この蛋白は細胞外にtandem EGF-like repeatsを有する構造的に新たな膜結合蛋白であることがわかった。今後、この因子を用い、昆虫の有する未知の不要細胞排除の分子機構を解析することが可能となった。

"Non-vectorization of malarial mosquitoes", no return to the protozoa of the nomadic mosquitoes Avoidance mechanism を明らかにすることをPurpose としてInsect の protozoa に対するBiological defense mechanism をAnalysis した. This year, (1) The invasion system of liver-cultured cell lines, protozoa, and protozoa was established. The invasion of protozoa can be achieved by culturing for 3 hours. The number of protozoal surface antigens, antibodies, and infected hepatocytes was reduced by 1% to 5% compared to untreated cells. The number of cells invaded by protozoa is the number of protozoa that can be detected once. The infection rate depends on the number of days after infection with mosquitoes, and the infection rate varies between hundreds and thousands of mosquitoes. Problems (stability of the infection rate, restrictions on the time it takes for protozoa to be taken out of the mosquito's body, and difficulty in taking out the protozoa at the same time)るものの, このinvasive system をいて, target とする insect-derived substance のantiprotozoal activity を検SO していくことがpossible となった. (2) A new viewpoint, a mechanism for understanding foreign matter in insects, and an explanation of the mechanism of foreign matter recognition in insects and a focus on the functions of body fluid cells in the state of change. During the transformation stage, the larvae cells are eliminated and the body fluid cells after pupation are removed and the molecular mechanisms are explained. The key to recognition and elimination of foreign matter is the same as that of する candidate factor として and new たな pupal body fluid cell membrane surface antigen 120 protein した. The body fluid cells of pupae and larvae are larger than those of larvae, which can be enlarged by poor food, and the protein and antibodies can be enlarged by poor food, and the activity of poor food can be hindered. Antibody アフィニティカラムにより purified した120 protein のpartial アミノacid alignment のinformation をもとにcDNA cloning を行った results, このprotein は extracellular にtandem EGF-like repeats are a new membrane-binding protein with a new structure. From now on, it is possible to analyze the molecular mechanisms of insects, exclude unknown factors, and eliminate cells.

项目成果

Zheng,Z-B.et al: "Selective inhibition of src protein tyrosine kinase by analogues of 5-S-glutathionyl-beta-alanyl-L-dopa." Chem.Pharm.Bull.46(12). 1950-1951 (1998)

Cheng，Z-B.et al：“5-S-谷胱甘肽-β-丙氨酰-L-多巴类似物选择性抑制 src 蛋白酪氨酸激酶。”

Kobayashi,A.,et al: "Identification and characterization of a putative sevenless homologue in the malaria vector Anopheles gambiae." Insect Molecular Biology. in press. (1999)

Kobayashi,A.,et al：“疟疾媒介冈比亚按蚊中假定的七同源物的鉴定和表征。”

Lee,W-J.et al: "Molecular cloning and chromosomal localization of a prophenoloxidase cDNA from the malaria vector Anopheles gambiae." Insect Molecular Biology. 7(イ). 41-50 (1998)

Lee, W-J. 等人：“疟疾载体冈比亚按蚊的分子克隆和染色体定位”，昆虫分子生物学 7(a)。

Zheng,Z-B,et al.: "Different Inhibitory Effects of 5-S-Glutathionyl-beta-alanyl-L-dopa(5-S-GA-L-D)Analogues on Autophosphorylation and Substrate Phosphorylation of Src Protein Tyrosine Kinase." Chem.Pharm.Bull.47(1). 136-137 (1998)

郑Z-B等人：“5-S-谷胱甘肽-β-丙氨酰-L-多巴(5-S-GA-L-D)类似物对Src蛋白酪氨酸激酶自身磷酸化和底物磷酸化的不同抑制作用”。

Fujimoto,Y.et al: "Two subunits of 26/29-kDa proteinase are probably derived from a common precursor protein." J.Biochem.in press. (1999)

Fujimoto,Y.et al：“26/29-kDa 蛋白酶的两个亚基可能源自共同的前体蛋白。”