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昆虫生体防御遺伝子の活性化経路の研究

昆虫生物防御基因激活途径研究

基本信息

批准号：
09780561
负责人：
小林綾子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780561/
关键词：
昆虫生体防御転写因子レクチン

项目摘要

(1) 今年度は、昨年度にクローニングした新規Rel-Ankyrin family因子59kDa蛋白の解析を更に進めた。既知のRHDとAnkとを有するrel family転写因子は活性化に伴うAnkyrinの分解が知られており59kDa蛋白は、分解することなく核において転写調節に働く点で、未知の転写活性化メカニズムに関与することが示唆されていた。まず、全長cDNAを用いて作成したりコンビナント蛋白の転写制御配列への結合能を解析した結果、確かにAnkyrin部分を含んだまま、認識配列に結合することが確認された。次に、このcDNAをハエ由来の培養細胞において強制発現させ、標的遺伝子の制御領域を持つレポーター遺伝子の転写活性化について解析したところ、単独では転写の活性化は見られず、co-factorあるいは何らかの修飾が必要であると考えられた。そこで、現在までに単離されているrel転写因子(Difやdorsal)との協調作用について解析したが、そのような作用は見られなかった。これらの結果は未だ解明されていない、昆虫生体防御の遺伝子制御機構における新たなシグナル伝達メカニズムの存在を強く示唆するものである。更に、59kDa蛋白の発現の組織特異性に関してウエスタンプロット解析を行った結果、予想された脂肪体組織以外にも様々な組織で発現していることがわかった。既知の生体防御転写因子とは異なる特色として、消化管に非常に強く発現が見られた。消化管は採餌により侵入する異物にふれる組織であることから、59kDa蛋白により制御される生体防御蛋白の存在が考えられる。(2) レクチン遺伝子転写制御領域をレポーター遺伝子の上流にもつhybrid遺伝子をショウジョウバエに導入し、そのtransformantを得た。現在、生体防御応答にてレポーター遺伝子の発現が誘導されることを確認中である。(1)の研究で見つかった新たな細胞内シグナル伝達系と、(2)で構築したレポーター遺伝子を導入したショウジョウバエで解析する細胞外シグナルとを組み合わせて、昆虫生体防御遺伝子の活性化経路の解明が可能になった。

(1)This year, the analysis of Rel-Ankyrin family factor 59kDa protein has been improved. We know that the RHD and Ank are related to the rel family factor activation, and the decomposition of Ankyrin is related to the 59kDa protein, decomposition, and nuclear regulation. Analysis of binding energy of cDNA encoding, encoding, sequencing and binding of full-length cDNA confirmed that the binding energy of Ankyrin was contained. In addition, the gene expression of the target gene was detected in cultured cells under stress, and the control field of the target gene was maintained. The gene expression of the target gene was analyzed and activated independently. The gene expression of the target gene was modified by co-factor. In addition, the coordination function of the factor (Dif? dorsal) and the function of the factor (Dif? dorsal) are analyzed. These results are not clear, insect biological defense gene control mechanism is new, the existence of a strong indication of the existence of the disease. In addition, the tissue-specific expression of 59kDa protein is related to the analysis of the protein, which is expected to occur in tissues other than adipose tissue. It is known that the biological defense factors are different, and the digestive tract is very strong. The digestive tract is the source of foreign matter invasion, and the existence of 59kDa protein in the digestive tract is the source of defense protein. (2)The hybrid hybrid hybrid Now, the biological defense response to the emergence of the virus is confirmed. (1)The study found that new intracellular protein expression systems,(2) the construction of extracellular protein expression systems, and (3) the elucidation of the activation pathway of insect biological defense proteins may be possible.