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ミオシンIアイソフォームの性質とクローニング

肌球蛋白 I 亚型的特性和克隆

基本信息

批准号：
09279201
负责人：
岡本洋
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Muroran Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は本重点領域研究補助金により血管平滑筋から重鎖の異なる2種類のミオシンIを単離、同定し、以下の新しい知見を得た。1.既に発表した分離精製法(J.Biochemistry(1996)120,971-976)を改良し、迅速かつ再現性の高い分離条件を確立した。2.二種類のアイソフォームそれぞれに対する特異抗体の調整を行いピコモルレベルの免疫学的微量定量法を確立した。3.ミオシンIのモータードメインおよび生体膜結合領域を選択的に限定分解する酵素処理条件を確立し、得られた断片の一次構造からミオシンIファミリーの中でサブタイプの帰属分類が出来た。4.構造機能解析を目的とするクローニングを行い、尾部をコードする遺伝子断片を得たのでさらに全長をカバーする遺伝子の分離を行っている。5.血管平滑筋ミオシンI発現の組織特異性を調べたところ大動脈以外に肺、心臓に存在を認めた。6.蛍光顕微鏡観察によりミオシンIの細胞内局在を明らかにした。さらに細胞分画法を用いて細胞内局在を見たところミオシンIの一部が細胞膜、細胞内小器官や細胞骨格のいずれとも結合していないこと見出した。現在、増殖因子等の刺激にともなう局在の変化について検討を行っている。

We have received two types of research grants in this focus area, namely, vascular smooth muscle, re-locking and differentiation, and the following new insights 1. The separation and purification method (J.Biochemistry(1996) 120, 971 -976) was improved, and the separation conditions for rapid and reproducible separation were established. 2. A microquantitative method for the regulation of specific antibodies to two kinds of immune systems was established. 3. The enzyme treatment conditions for the selection of the membrane binding domain were established, and the primary structure of the fragment was obtained. 4. Structure function analysis: target, tail, fragment, length, fragment separation 5. Tissue specificity of vascular smooth muscle development is regulated and recognized in the lung and heart outside the aorta. 6. Microscopic observation of the intracellular structure of the cell The cell division method is used to divide the cell into two parts: cell membrane, cell skeleton and cell skeleton. Now, growth factors and other stimuli are in the process of transformation.