SAGE法によるヘリコバクターヘルマニー感染応答遺伝子の解析

SAGE法分析赫曼螺杆菌感染反应基因

• 批准号: 14570479
• 负责人: 村瀬 邦彦
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14570479/
• 关键词: Helicobacter heilmanni; Helicobacter pylori; VacA; CagA; SAGE

Helicobacter heilmannii、Helicobacter pyloriなどのHelicobacter属が胃粘膜に感染し宿主免疫応答を引き起こす際、空砲化毒素(VacA)が重要な病原因子である。そこで、VacAに着目し、その分離・精製を試みた。まず、精製・分離には大量の菌体を必要とするため、上記標準株を液体培養する系を構築した。同培養上清から、ゲルろ過やHPLC法などさまざまな分離法を試み、VacA活性を有する分画を探索した。VacA活性をneutral red及びflow cytometry法にて確認した結果、同分画にVacA活性を有する成分を分離でき、さらに精製することに成功した。但し、渉猟し得るVacA蛋白量は微量であり、さらなる調整が必要である。さらにVacAに対する宿主免疫応答を解析する目的で、C57BL mouseにVacAを投与し病原性を確認したが、病変は軽微であり、さらに大量のVacAを要するものと考えている。VacA以外に、cytotoxin-associated gene A(CagA)と呼ばれる病原因子もまた、細胞増殖や運動能などを引き起こし、発ガンとの関連で注目されている。しかし、Helicobacter heilmanniiがCagAを有しているかは明らかでないため、cagA(或いはcag pathgenicity island genes)の遺伝子の存在を確認してる。VacAのより精巧な分離・精製を開発していき、同菌の宿主免疫応答をSAGE法で網羅的に解析していきたい。

Helicobacter heilmannii, Helicobacter pylori な ど の Helicobacter genus が gastric mucosa に infection し host immune 応 answer を lead き up こ す interstate, air ball toxins (VacA) が important な pathogenic factor で あ る. Youdaoplaceholder0 みた で, VacAに, そ, そ, を, test みた. Youdaoplaceholder0, refining and isolating に に a large amount of <s:1> bacteria を necessary とするため, the above standard strain を liquid culture する line を construction た た. With culture supernatant か ら, ゲ ル ろ too や HPLC な ど さ ま ざ ま な separation を try み, VacA active を す る points draw を explore し た. VacA active を neutral red and び flow cytometry method に て confirm し た results, with points に VacA active を have す る component separation を で き, さ ら に refined す る こ と に successful し た. However, it is necessary for <s:1>, involved in 猟, to obtain るVacA protein in a <s:1> trace amount であ and さらなる adjustment が. Youdaoplaceholder5. さ ら に VacA に す seaborne る host immune 応 answer を parsing す る purpose で, C57BL mouse に VacA を cast with し pathogenicity を confirm し た が, illness - は 軽 micro で あ り, さ ら に large の VacA を to す る も の と exam え て い る. VacA に, cytotoxin - associated gene A (CagA) と shout ば れ る pathogenic factor も ま た や, cell rights colonization movement can な ど を lead き up こ し, 発 ガ ン と の masato even で attention さ れ て い る. し か し, Helicobacter heilmannii が CagA を have し て い る か は Ming ら か で な い た め, CagA (or い は the cag pathgenicity island genes) の heritage 伝 son の exist を confirm し て る. VacA の よ り choiceness な separated, refined を open 発 し て い き, with bacteria の host immune 応 answer を SAGE method で snare に parsing し て い き た い.