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細胞膜分子の超拡散の機構と生理的意義:1蛍光分子の高速追跡法開発によるアプローチ

细胞膜分子超扩散的机理和生理意义：1. 开发荧光分子高速追踪方法

基本信息

批准号：
16570133
负责人：
RITCHIE Kenneth
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、以下の3つである。(1)1分子蛍光ビデオ追跡の時間分解能を向上させ、1ミリ秒を達成する。(2)リピッドアンカー型情報伝達分子が異常に速く拡散する機構を解明する。(3)細胞膜への結合様式が違う分子の拡散運動を調べ、それと非正常拡散との関連を検討する。本年度は、高速自動1分子蛍光追跡顕微鏡を作成した。そのため、ラベル化された分子の蛍光像を4分割・アバランシェ・フォトダイオード(APD)に投影することによって、既存の全反射蛍光顕微鏡の性能を高めた。APDは、高時間分解能で1分子蛍光を追跡するのに十分な高い感度を持っている。このデータを記録するために、高速パソコン(高速4チャンネルデータ取り込みボードは既設)を購入した。長時間観察のためには、ピエゾスキャニングステージを顕微鏡に取り付、閉ループフィードバック回路を用いて、蛍光イメージが常にAPD上の中心になるように設計した。このようにして、高速自動1分子蛍光追跡顕微鏡を使用することで、生きた細胞上で蛍光ラベル化された分子の長時間高分解能軌跡のデータ収集が容易になった。同時に、この顕微鏡を使って、リピッドアンカー型タンパク質が異常に早く拡散する機構解明を行った。まず、この速い拡散を解明する第一歩として、リピッド様蛍光プローブであるDiI(3,3'-didodecylindo-carbocyanine)の動きを観察し、これとリピッドアンカー型分子の速い拡散とを比較した。

The purpose of this study is to: (1)1 Time resolution of molecular luminescence tracking can be achieved in one minute and one second. (2)The mechanism of abnormal speed dispersion of information transmission molecules is explained. (3)Cell membrane binding patterns are regulated by molecular dispersion, and the relationship between abnormal dispersion is discussed. This year, high-speed automatic optical tracking and micro-mirror production The optical image of the molecule is divided into four parts. The projection of the molecule is divided into four parts. The performance of the existing total reflection optical microscope is improved. APD has a very high sensitivity and high time resolution for tracking of a molecule of light. This is the first time I've ever seen a woman. Long time observation and observation of the center of the APD. This allows for easy collection of long term, high resolution molecular trajectories using a high speed, automated, 1-molecule optical tracking microscope. At the same time, the micro-mirror is used to solve the problem of abnormal structure. The first step in the study of molecular dynamics is to investigate the molecular dynamics of the complex.