新しい微生物探索系の理論的構築

点击翻译按钮获取中文摘要

1.蛋白質を効率よく分泌生産する真核微生物として、糸状菌Trichoderma virideを選択し、本菌を宿主とする有用蛋白質の分泌系を確立した。麹菌のタカアミラーゼ遺伝子を本菌へ導入し、タカアミラーゼを生産する形質転換株を複数得ることができた。本菌で強いプロモーター活性を有するベクターを構築した。2.極めて多数の微生物について、コレステロール合成阻害剤を探索し、紅麹菌からモナコリンJ、K、L等を発見した。モナコリンJを特異的に著量生産する変異株を分離し、その生合成機序の主要な部分を解明した。3.新規な探索法で発見した新しい耐熱、耐酸プロテアーゼが、硬い構造を持つ蛋白質を限定分解し失活させること、極めて高い凝乳活性を有することを見出した。また、数種のトレハラーゼ阻害剤を発見し、その構造解析を行い、疑似2糖様であることを明らかにした。4.新規なコレステロール合成阻害剤(1233A)の活性の必須のβ-ラクトン部分の絶対構造が、HMGーCoA合成酵素については2R、3R体であること、リパーゼでは2S、3S体が重要であることを示した。また、神経芽細胞腫を用いた検索系を確立し、新物質ラクタシスチンを発見した。5.酵母のグリオキサール代謝系の研究から、遺伝子組換え菌により大量のSーラクトイルグルタチオンの生産が可能となった。本物質は抗炎症作用があり医薬等として有用なので、大量生産の条件並びに精製法を検討した。6.ピロロキノリンキノン(PQQ)蓄積菌の培養液中へのPQQの生成、蓄積がPQQ酵素のターンオーバーの結果であることを示した。PQQを補酵素とするメタノール脱水素酵素の培養液中の消長について調べた結果、本酵素を特異的に不活性化する酵素を見出した。