微生物酵素による新しい物質交換系の開発

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本年度研究実績は以下の通りである。1.メタノール資化性のセリン生産菌のセリン代謝に関与する酵素類を均一にまで精製し諸性質を検討するとともに,新たにセリンの高生産株を見いだした。2.好熱性放線菌の耐熱性フェニルアラニン脱水素酵素を均一にまで精製するとともに本酵素遺伝子を発現する大腸菌クローン株を得た。3.酵母カルボキシペプチダーゼなど各種プロテアーゼを用いて多数のペプチドの標準合成法を設定し,食品や医療に重要なオリゴペプチド混合物を合成した。4.放線菌のホスホリパーゼDによるホスファチジルコリンとDーまたはLーセリンとからのホスファチジルDーまたはLーセリンの合成を行うとともにリパーゼによる魚油の選択的加水分解を行った。5.青かびのγーグルタミルトランスペプチダーゼを均一にまで精製し,本酵素を用いて抗癌物質前駆体γーグルタミルーρーヒドロキシアニリンを合成した。6.固定床バイオリアクターを用いてテトラピロール化合物群の共通前駆体5ーアミノレブリン酸の菌体外連続生産で高収量を得るとともにFe濃度に依存したヘムの菌体外分泌の現象を見いだした。7.エステラーゼを用いて分子に不斉中心を導入し,カルバペネム抗生物質,ビタミンD関連物質,血小板活性化因子の新アンタゴニストを設計合成した。8.リパーゼによる不斉加水分解反応を利用して放線菌ホルモンのAーファクターの合成原料となる(S)ー(ー)ーパラコン酸を合成した。9.シッフ塩基ー銅キレート形成反応を利用したタンパク質の架橋法を確立し,本法が異種タンパク質間を選択的に連結する特色をもち,複合酵素モデル構築に有用であることを見いだした。10.酵母ペルオキシゾーム脂肪酸βー酸化系の複合共役酵素系を利用して高級脂肪酸からのアセチルーCoAの合成を行った。11.枯草菌のウンデカプレニルニリン酸合成酵素に人工基質をはたらかせて4位にキラルなメチル基をもつ種々のイソプレノイドアルコールを合成した。