权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

微生物のカルボニルンレダクタ-ゼ類の基質認識機構の解析と生物活性物質生産への応用

微生物羰基铝还原酶底物识别机制分析及其在生物活性物质生产中的应用

基本信息

批准号：
03236223
负责人：
山田秀明
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03236223/
关键词：
カルボニル還元酵素 Dーパントテン酸酵素的不斉還元

项目摘要

前年度に引き続いて,高い立体選択性を有する(1)ケトパント酸レダクタ-ゼ,(2)アルデヒドレダクタ-ゼの各種精製酵素について詳細な諸性質の解析を行なった。(1)Pseudomonas maltophiliaから単離精製したケトパント酸レダクタ-ゼは,分子量30,500の同一サブユニット3〜5個で構成されたオリゴマ-酵素であり,補酵素としてはNADPHのみが有効であった。また基質特異性に関しては非常に厳密で,ケトパント酸以外には2ーケトー3ーヒドロキシイソ吉草酸のみがケトパント酸の1.35%の反応速度で還元されることが判明した。立体選択性も極めて高く,ケトパント酸からの生成物はDーパント酸のみ(100%ee)であった。さらに本菌よりDーパントテン酸要求性変異株を誘導した所,ケトパント酸レダクタ-ゼ活性の欠損が認められ,またDーパントテン酸非要求性の復帰変異株においては,親株同様の本酵素活性が検出された。従って本酵素は,生体内においてDーパントテン酵生合成に関与している事が判明した。(2)Sporobolomyces salmonicolorから単離精製したアルデヒドレダクタ-ゼは,(R)ー4ークロロー3ーオキソブタン酸等のβーケトエステル類に作用し,対応する(R)ーアルコ-ル(100%ee)を生成した。また本酵素は,P__ーートロベンズアルデヒドやグリセルアルデヒド等のアルデヒド類を良好な基質とし,人肝臓のアルデヒド還元酵素と相同性のあるN末端部分アミノ酸配列が認められる事から,互いに類似した酵素と考えられる。Candida macedoniensisから単離精製したアルデヒドレダクタ-ゼは,分子量45,000のモノマ-酵素でNADPH依存性であり,ケトパントテン酵エチルからの還元生成物はDーパントテン酸エチル(100%ee)であった。本菌体を触媒として本反応(基質80g/l)を行った所,モル転換率は97.2%,eeは98%以上であった。同様にケトパントテン酸メチルやケトパントテン酸イソプロピル等の不斉還元も可能であった。

In the previous year, the high stereoselectivity of the enzyme was (1) the enzyme was selected from the group of enzymes,(2) the enzyme was selected from the group of enzymes, and the properties of the enzyme were analyzed. (1)Pseudomonas maltophilia is composed of 3 ~ 5 members of the same enzyme with molecular weight of 30,500. The substrate specificity is very high, and the reaction rate is 1.35% except for the acid. Stereoselectivity is very high, and the product of the acid is very high (100%ee). In addition, due to the induction of the D-pentenoic acid required variant of this strain, a loss in the activity of the D-pentenoic acid lidakta-lidakta-li This enzyme is responsible for the identification of biological processes in vivo. (2)Sporobolomyces salmonicolor is produced from (R) 4,(R) 3,(R) 4,(R) 4,(R) 5,(R) 6,(R) 7,(R) 8,(R) 8,(R) 9,(R) 9,(R) 10,(R) 11,(R) 12,(R) 13,(R) 14,(R) 15,(R) 16,(R) 17,(R) 18,(R) 19,(R) 19, This enzyme is a good substrate for human liver enzymes, such as the N-terminal part of the enzyme, which is similar to the N-terminal part of the enzyme Candida macedoniensis, molecular weight 45,000, NADPH-dependent enzyme, derivative D, acid (100% ee) The catalyst was used in the reaction (substrate 80g/l), and the conversion rate was 97.2%, ee was more than 98%. In the same way, it is possible to reduce the cost of production by reducing the cost of production.