原核・真核生物におけるDNAトランスポジションの調節機構の研究

原核生物和真核生物DNA转座调控机制研究

• 批准号: 01618505
• 负责人: 町田 泰則
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01618505/
• 关键词: 動く遺伝子; トランスポジション; Ac因子; Is_1; 遺伝変異

転移DNA因子は、さまざまなDNA再編成を引き起こし、遺伝情報の大きな変化の原因の一つとなっている。このDNA転移は、原核生物においてはその頻度を低く保つことによって、また真核生物では発生過程での時期や組織を限定することにより調節されていると考えられている。これらの性質は、必要以上の変異を制御し生物集団の中で変異を固定拡大していくために重要な意味を持っていると考えられる。我々は、原核生物の転移DNA因子としては、最も小さい因子であるIS1を、また真核生物のものとしては、トウモロコシのAc因子をとりあげ、それらの転移の調節機構を研究している。これまでの研究で、IS1転移にはinsAとinsBの二つの遺伝子領域が必要であるが、insA領域だけが発現するとinsAとinsBの発現を阻害し、転移を制御することがわかった。つまり、insAタンパク質は、IS1転移を抑制するリプレッサ-機能を持っていると考えられる。Ac因子の研究では、これまで、その転移を容易に検出する方法がなかったが、我々は、Ac転移反応が起こるとウイルスの感染が誘発される方法を開発している。さらに、insB遺伝子とlacZを連結したキメラ遺伝子を作製し、大腸菌で発現させ、β-ガラクトシダ-ゼ抗体を用いてキメラタンパク質の大きさを検討したところ、期待値よりも大きいタンパク質のバンドが得られた。このタンパク質のサイズがinsAとinsB-lacZ融合タンパク質のものと等しいことから、in vivoでは、insAとinsBが何らかの機構で融合し、それが、トランスポゼ-スとして機能する可能性も考えられる。Ac因子の研究については、カリフラワ-モザイクウィルスを用いた。Ac転移のassay系ができたが、まだ、実用化するのには感度をさらに上げる必要がある。今後、PCR法等を組み合わせることにより感度を上げる計画である。

Planning to move the DNA factor は, さ ま ざ ま な DNA plait を lead き again こ し, heritage 伝 intelligence の big き な variations change の reason の つ と な っ て い る. Planning move は こ の DNA, prokaryotes に お い て は そ の low frequency を く bartender つ こ と に よ っ て, ま た eukaryotes で は 発 birth process で の period や organization を qualified す る こ と に よ り adjust さ れ て い る と exam え ら れ て い る. こ れ ら の nature は, necessary above の - different を suppression し 団 biological set of の で - different を fixed company, big し て い く た め に important な mean を hold っ て い る と exam え ら れ る. I 々 は, prokaryotes の planning move DNA factor と し て は, most small も さ い factor で あ る IS1 を, ま た eukaryotes の も の と し て は, ト ウ モ ロ コ シ の Ac factor を と り あ げ, そ れ ら の planning move の regulator を research し て い る. こ れ ま で の research で, IS1 planning move に は insA と insB の two つ の heritage 伝 sub-fields が necessary で あ る が, insA だ け が 発 now す る と insA と insB の 発 を resistance against し, now planning to move を suppression す る こ と が わ か っ た. つ ま り, insA タ ン パ ク は, IS1 planning move を inhibit す る リ プ レ ッ サ - function を hold っ て い る と exam え ら れ る. Ac factor の research で は, こ れ ま で, そ の planning move を easy に 検 out す る method が な か っ た が, I 々 は, Ac planning to move against 応 が up こ る と ウ イ ル ス が の infection induced 発 さ れ る method を open 発 し て い る. さ ら に, traces of insB 伝 son と lacZ を link し た キ メ ラ heritage を son 伝 し, coliform で 発 now さ せ, beta ガ ラ ク ト シ ダ - を ゼ antibody with い て キ メ ラ タ ン パ ク qualitative の big き さ を beg し 検 た と こ ろ, looking forward to numerical よ り も big き い タ ン パ ク qualitative の バ ン ド が must ら れ た. こ の タ ン パ ク qualitative の サ イ ズ が insA と insB - lacZ fusion タ ン パ ク qualitative の も の と etc し い こ と か ら, the in vivo で は, insA と insB が what ら か の し で fusion, そ れ が, ト ラ ン ス ポ ゼ - ス と し て function す る possibility も exam え ら れ る. The Ac factor is used to study に に に て て て た and カリフラワ-モザ モザ ウィ ウィ ウィ スを スを. Ac planning move の assay system が で き た が, ま だ, be use す る の に は sensitivity を さ ら に on げ る necessary が あ る. In the future, the PCR method and other を groups of み will be combined with the わせる わせる とによ である である sensitivity を げる plan である.

项目成果

N.Shimoda,J.Nagamine,S.Usami,M.Katayama,Y.Sakagami & Y.Machida: "Control of expression off Agrobacterium vir genes by the synergistic action of phenolic signal molecules and monosaccharides in plants"

N.Shimoda,J.Nagamine,S.Usami,M.Katayama,Y.Sakagami

岡本繁久、町田泰則: "クラウンゴ-ル腫瘍=T-DNA転移の分子機構=" 蛋白質・核散・酵素. 34. 1804-1814 (1989)

Shigehisa Okamoto、Yasunori Machida：“冠瘿瘤的分子机制 = T-DNA 转移”蛋白质、细胞核、酶。 34。1804-1814 (1989)

S.Matsumoto,Y.Itoh & Y.Machida: "Mode of integration of Agrobacterium T-DNA into plant chromosome:Involvement of DNA homology between T-DNA and plant DNA"

松本松本,伊藤勇

Chiyoko Machida & Yasunori Machida: "Regulation of IS1 Transposition by the insA Gene Prpduct" Jounal of Molecular Biology. 208. 567-574 (1989)

町田千代子

松本省吾,町田千代子,町田泰則: "トランスジェニック植物の作製法" 細胞工学. 8. 721-727 (1989)

Shogo Matsumoto、Chiyoko Machida、Yasunori Machida：“生产转基因植物的方法”《细胞工程》8. 721-727 (1989)。