滑り運動とアクチン線維束の協同性

肌动蛋白纤维束的滑动运动和协同性

• 批准号: 02239206
• 负责人: 藤目 杉江
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02239206/
• 关键词: 滑り運転; アクチン; 分子内切断; ミオシン; 車軸藻

アクチン・ミオシン両蛋白質相互作用による滑り運動の発現過程において、アクチン分子構造の変化と運動性の関連を、分子内切断に行うことによって調べた。アクチンを種々蛋白質分解酵素により限定分解し、特定の場所に切断を入れる。これら切断アクチンは塩添加により重合して線維構造を形成する。しかし、プロテア-ゼKによる切断ではファロイジン存在下でのみ重合した。電子顕微鏡観察から、これらアクチン線維は全て二重らせん構造を持ち、HMM修飾により矢尻構造を形成、形態的には未切断アクチンと変らなかった。だが、ミオシンATPア-ゼの活性化は小さく,特にサブチリシン処理では1桁、プロテナ-ゼK切断では2桁低い活性化しか見られなかった。骨格筋HMMをコロジオン膜を張ったカバ-グラスに付着させ,in vitno motility Assayを行ったところ、ほヾアクトミオシンATPア-ゼ活性に対応した滑り運動が見られた。サブチリシン処後アクチンでは約3割の線維が運動し、他は結合状態で止っている。結合している線維が滑り始める或はその逆が観察されることから、化学エネルギ-の力学エネルギ-への変換過程がスム-スに進まなくなっている事が判る。又、プロテナ-ゼK処理アクチンは、殆んど運動性を示さなかった。骨格筋ミオシンの代りに車軸藻ミオシンを用いた運動アッセイでは、用いた6種類の切断アクチは全て非常によい運動性を示した。特に、骨格筋ミオシンでは殆んど運動性を失ったプロテナ-ゼK処理アクチンですら未処理アクチンと変らない運動性を示した。この事は、車軸藻ミオシンと骨格筋ミオシンではアクチンの相互作用部位が異ること、化学→力学エネルギ-変換の作用機作が非常に異なったものであることを示唆する。

ア ク チ ン · ミ オ シ ン struck protein interactions に よ る slide り movement の 発 now process に お い て, ア ク チ ン の molecular structure - the と motility の masato even を, intramolecular cut-off line に う こ と に よ っ て adjustable べ た. Youdaoplaceholder0 チ チ を を kinds of 々 protein-decomposing enzymes によ <s:1> restrict the decomposition of <s:1> and cut を into れる at specific <s:1> sites に. The <s:1> れら cuts off the ア チ チ チ <s:1> the addition of <s:1> salt によ overlaps the <s:1> line dimension structure を forms する. し か し, プ ロ テ ア - ゼ K に よ る cut で は フ ァ ロ イ ジ ン presence で の み overlap し た. Electronic 顕 micromirror 観 examine か ら, こ れ ら ア ク チ ン line d は て all double ら せ ん tectonic を hold ち, HMM modified に よ り vector を tajiri structure formation, morphology of に は not cut ア ク チ ン と - ら な か っ た. だ が, ミ オ シ ン ア ATP - ゼ の activeness は small さ く, trevor に サ ブ チ リ シ ン 処 Richard で は 1 girder, プ ロ テ ナ - ゼ K cut で は 2 low girder い activeness し see か ら れ な か っ た. Skeletal muscle HMM を コ ロ ジ オ ン membrane を zhang っ た カ バ - グ ラ ス に pay the さ せ, in vitno motility Assay を line っ た と こ ろ, ほ ヾ ア ク ト ミ オ シ ン ATP ア actiity ゼ に 応 seaborne し た slide り movement が see ら れ た. Youdaoplaceholder0 <e:1> is followed by ア チ チ チ で で が about 3 cm of the cudol line dimension が motion <s:1> and the other <s:1> combined state で stops って る る る る. Combining し て い る line d が slide り beginning め る or は そ の inverse が 観 examine さ れ る こ と か ら, chemical エ ネ ル ギ - の mechanics エ ネ ル ギ - へ の variations in process が ス ム - ス に into ま な く な っ て い が convicted る る thing. Furthermore, the processing of プロテナ-ゼK on ア った チ チ and almost ん <s:1> shows the movement を of さな った った. Skeletal muscle ミ オ シ ン の generation り に axle algal ミ オ シ ン を with い た movement ア ッ セ イ で は, use い た 6 kinds の cut ア ク チ は て all very に よ い motility を shown し た. に, skeletal muscle, ミ オ シ ン で は perilous ん ど motility を lost っ た プ ロ テ ナ - ゼ K 処 Richard ア ク チ ン で す ら not 処 Richard ア ク チ ン と - ら な い motility を shown し た. は こ の, axle algal ミ オ シ ン と skeletal muscle ミ オ シ ン で は ア ク チ ン の interaction part が different る こ と, chemical and mechanical エ ネ ル ギ - variations in の function machine for が very に different な っ た も の で あ る こ と を in stopping す る.

项目成果

Takiguchi,K.HigashiーFujime,S.: "In vitro motility of skeletal muscle myosin and its proteolytic fragments." J.Biochem.(Tokyo). 107. 671-679 (1990)

Takiguchi, K. Higashi-Fujime, S.：“骨骼肌肌球蛋白及其蛋白水解片段的体外运动。”J.Biochem.（东京）107. 671-679（1990）。

HigashiーFujime,S.: "Reconstitution of active movement in vitro based on actinーmyosin interaction." Int.Rev.Cytol.125. 95-138 (1991)

Higashi-Fujime, S.：“基于肌动蛋白-肌球蛋白相互作用的体外主动运动重建。”Int.Rev.Cytol.125（1991）。