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車軸藻ミオシンの機能と構造の特異性と同一性

腋窝肌球蛋白的功能和结构特异性及特性

基本信息

批准号：
09279221
负责人：
藤目杉江
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

車軸藻ミオシンは脅威的な速さの滑り運動を呈する。このミオシンの構造及び力学的・生化学的特性を調べ、骨格筋ミオシンとの比較において同一性と特異性を明らかにする中で、滑り運動の機能発現の分子メカニズムの詳細を探ることを目的としている。車軸藻ミオシンのクローニングについては、ミオシン頭部共通配列をプライマーに用いたPCRから2種クローンを得た。それらはほたて貝ミオシンと72%、Dictyosteliumミオシンと56%の相同性を持つ。全長シーケンスを進める一方、何れが速いミオシンかを知るため、各々大腸菌発現系を作成したのでそれら蛋白質の抗体作成を行っている。アクトミオシンATP分解活性がその速さを説明するほど高いか否かの知見は重要である。精製車軸藻ミオシンのアクチン活性化ATPaseを今回測定したところでは13s^<-1>と骨格筋のそれと同程度であった。一方ミオシンのbasicなATPae活性はその中間体の寿命の長さを反映しているが、その寿命の長さが滑り速度と深く関わっていることを我々は見出し報告した。従って、車軸藻ミオシンのbasic ATPaseの知見は重要であるが、今回の測定では検出出来なかった。大量かつ高純度の車軸藻ミオシンが必要で今後の課題として残った。アクチンサブドメイン2にある40-50ループの切断は骨格筋ミシンによる滑り速度を大きく減少させる。ところが車軸藻ミシンでは全く減少しない。このループ切断は天然トロポミオシンにより機能回復することを見いだした。然し、車軸藻ミオシンではトロポミオシン結合アクチン線維は全く運動性を示さなかったことは既に報告た。このアクチン結合部位の特異性が車軸藻ミオシンの滑り速度の速さに繋がる事を示唆しており、力学・生化学的アプローチから今後検討して行きたい。

Axle speed and sliding motion are threatened. The structural and mechanical characteristics of the protein and the biochemical characteristics of the protein and the protein are compared. The identity and specificity of the protein and the functional development of the protein and the protein are discussed in detail. Axle algae, such as fish, fish, 72% and 56% of Dictyostelium were identical. The development of full-length E. coli and the production of antibodies to E. coli It is important to know whether the ATP decomposition activity is rapid or not. The activity of ATPase in the purified cells was measured at the same time<-1>. The basic ATPae activity reflects the longevity of the intermediate, the longevity of the intermediate, and the speed at which it slides. It is important to know the basic ATPase of the axle algae. A large number of high-purity axle algae are necessary for future problems. The speed of sliding is greatly reduced by 40-50 degrees. The axle is completely reduced. This is the first time that I've seen this. However, the axle is not easy to operate. It is easy to operate. It is easy to operate. The specificity of the binding sites of these molecules varies from the speed of rotation to the speed of rotation.