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大腸菌HUタンパクの機能領域とDNA結合様式の解析研究

大肠杆菌HU蛋白功能区及DNA结合模式的分析研究

基本信息

批准号：
02263213
负责人：
今本文男
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02263213/
关键词：
HUタンパク質変異HU 核様体大腸菌 DNA結合

项目摘要

HUは広く細菌種間などに保存されているII型DNA結合性タンパク質である。従来、HUは大腸菌核様体の主要構成因子としてヒストン様の働きをしていると考えられてきた。しかし、我々によってHU遺伝子がクロ-ン化され、その欠失変異をもつ大腸菌が作成されて、HUがFプラスミドのori2などでのDNA複製開始、MuDNAの転座複製、各種DNAの逆位転座などの部位特異的DNA組換えの諸反応に必須に要求されていることが判明した。このことから、HUタンパクはヒストンのようにDNAに部位非特異的に結合すると共に、一方ではDNAのある局所的構造に優位に結合し、DNA高次構造(ル-プなど)の形成によってシグナル間の機能的連鎖反応を制御する因子であると考えられた。本研究では、クロ-ン化HU遺伝子の改変によって作成した種々の点変異をもつHUタンパクの機能を解析し、DNA結合などに必要な機能ドメインを明らかにした。HUは約90ケのアミノ酸残基からなる塩基性蛋白質であって、C末端側の逆平行βーsheet構造領域でDNAと結合すると考えられている。我々は、先ずHU1について4種類の点変異を作成し、実際にこの領域のArg^<58>→GlyとArg^<61>→Glyの2重変異と、Phe^<47>→Thr変異をもつHU1がDNA結合性を失っていることを観察した。細胞内における変異HUの機能は、hupAーhupB欠失変異株に変異HU遺伝子プラスミドを導入し、変異HUのみをもつ形質転換菌を作成して調べた。HU2については、変異作成に有利なカセット変換構造をもつhupA遺伝子を構築し、一連の点変異を作成した。HUがDNA高次構造変換を誘起するためには、この蛋白質がDNAで2量体や多量体を形成する必要があると思われる。これらのHU機能ドメインは一連の点変異の分析によって明らかになった。

The combination of HU bacteria and type II DNA was used to preserve the combination of bacteria and bacteria. In recent years, HU Sclerotinia sclerotiorum is mainly responsible for the formation of factors. For example, if you want to make a copy of your HU system, you will need to make a copy of your DNA, your DNA copy of your DNA copy, your MuDNA copy, and the DNA response of all kinds of DNA reversals that are specific to your location. You must verify that your response is correct. In this paper, the results show that the combination of the non-specific parts of the DNA, the combination of the location of the DNA on one side, and the high-order construction of the DNA system are the key factors that affect the performance of the machine. The purpose of this study is to change the HU sub-system into a variety of sub-models. In this study, it is necessary to analyze the performance of the HU engine by means of the analysis of the mechanical energy analysis and the combination of the DNA with the necessary mechanical analysis. About 90% HU, acid residues, amino acid residues, basic proteins, C-terminal antiparallel β-sheet, domain DNA, and C-terminal antiparallelism were tested. We are responsible for the following information: first, the HU1 information system is completed, and the international information field is Arg ^ & lt;58> Gly Arg ^ & lt;61> Gly. The combination of HU1 and DNA is very important in the field of international trade. The intracellular DNA was detected by HU, and the missing strain of hupA hupB was isolated from the HU strain. The bacteria were infected, and the bacteria were infected by the bacteria. It is advantageous to use the HU2 to make sure that it is advantageous to make the hupA, and then to make it. HU DNA high-quality products are required to form multiple bodies, such as protein, protein, DNA, multi-body, multi-body, and so on. The HU machine will be able to tell you how to do the analysis.