ネコ免疫不全ウイルスによるエイズの動物病態モデルの確立とその解析

猫免疫缺陷病毒引起的艾滋病动物病理模型的建立与分析

• 批准号: 03219203
• 负责人: 見上 彪
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03219203/
• 关键词: ネコ免疫不全ウイルス; 遺伝子クロ-ン; 免疫不全様症状; ネコ; In vitro宿主域

ネコ免疫不全ウイルス(FIV)は、1986年アメリカで、免疫不全様症状をもつネコから初めて分離された。FIVは、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)と同じ、レンチウイルス亜科に属し、ネコにおいては、ヒトと同様の経過を経て、免疫不全症を誘発することが、臨床疫学的に確認されており、FIVとネコの系は、ヒトエイズの発症動物モデルになると考えられる。本年度は主として我々の分離したFIVの遺伝子クロ-ンを作出し、他FIVとの比較を行ない、以下の成績を得た。FIV TM1株,FIV TM2株の感染性遺伝子クロ-ンは両クロ-ンともに,制限酵素地図レベルでは,アメリカでさきに分離されたPetaluma株と大きく異なった。TM1株の部分塩基配列並びに,TM2株の全塩基配列を決定した。その結果,Petaluma株とは,env領域で約80.9%のホモロジ-を持つことが明かとなり,FIVもHIVやSIVと同じくheterogeneityがあると考えられた。次いで,両クロ-ンをネコ腎由来上皮系細胞であり,Petaluma株に感受性があるCRFK細胞にトランスフェクトし,培養上清中のマグネシウム依存性の逆転写酵素活性を測定したところ,活性は,トランスフェクト後4日をピ-クとして以後減少し,38日後には検出されなくなった。またトランスフェクト後,4日目の上清をCRFK細胞,MYA‐1細胞に接種したところ,MYA‐1細胞のみに感染が成立した。次いでFIV TM1株感染性遺伝子クロ-ン由来ウイルスのin vivoでの感染性を調べた。感染性クロ-ン由来ウイルス感染MYA‐1細胞をSPFネコに腹腔内接種したところ,westernblottingにより8週で抗体の陽転が確認できた。また4週目からウイルスが再分離されはじめ,病理検索のため安楽死させた20週目までウイルスが分離され続けた。

ネ コ immune insufficiency ウ イ ル ス ア は (FIV), 1986 メ リ カ で, incomplete immune others symptoms を も つ ネ コ か ら early め て separation さ れ た. FIV は, ヒ ト immune insufficiency ウ イ ル ス (HIV) と じ, レ ン チ ウ イ ル ス 亜 に genera し, ネ コ に お い て は, ヒ ト と with others の 経 too を 経 て, incomplete immune disorder を 発 lure す る こ と が, clinical epidemiology に confirm さ れ て お り, FIV と ネ コ の は, ヒ ト エ イ ズ の 発 disease animal モ デ ル に な る と exam え ら れ る. This year は main と し て I 々 の separation し た FIV の heritage 伝 son ク ロ - ン を し, he FIV と の is line を な い, the following の achievements を た. FIV TM1 strains, FIV TM2 の infective strains heritage 伝 son ク ロ - ン は struck ク ロ - ン と も に, limitations enzyme to 図 レ ベ ル で は, ア メ リ カ で さ き に separation さ れ た Petaluma strains と big き く different な っ た. Strain TM1 has a <s:1> partial base combination and びに, while strain TM2 has a <s:1> full base combination を determines <s:1> た. そ の results, Petaluma と は, env field で about 80.9% の ホ モ ロ ジ - を hold つ こ と が Ming か と な り, FIV も HIV や sivs と with じ く heterogeneity が あ る と exam え ら れ た. Time い で, struck ク ロ - ン を ネ コ renal epithelial cell origin で あ り, Petaluma strains に susceptibility が あ る CRFK cells に ト ラ ン ス フ ェ ク ト し, in the culture supernatant の マ グ ネ シ ウ ム dependency の inverse planning write を enzyme activity determination し た と こ ろ, active は ト ラ ン ス フ ェ ク ト after 4 を ピ - ク と し て reduce し later, 38 days Then に 検 検 comes out されなくなった. ま た ト ラ ン ス フ ェ ク ト, 4 eyes の supernatant を CRFK cells, MYA に ‐ 1 cells inoculated し た と こ ろ, MYA ‐ 1 cell の み に infection が established し た. The infectious progeny of the substrain で でFIV TM1 伝 ロ ロ -<e:1> originates from ウ ウ ス ス ス <s:1> in vivoで を infectious を べた べた. Infectious ク ロ - ン origin ウ イ ル ス infection MYA ‐ 1 cell を SPF ネ コ に intraperitoneal inoculation し た と こ ろ, westernblotting に よ り 8 weeks で antibody の Yang planning が confirm で き た. 4 weeks ま た mesh か ら ウ イ ル ス が reseperation さ れ は じ め, pathological 検 cable の た め Ann joy dead さ せ た 20 weeks mesh ま で ウ イ ル ス が separation さ れ 続 け た.

项目成果

Kiyomasu,T.et al: "Identification of feline immunodeficiency virus rev gene activity." J.Virol.65. 4539-4542 (1991)

Kiyomasu,T.et al：“猫免疫缺陷病毒 rev 基因活性的鉴定。”

Kawaguchi,Y.et al: "Feline herpesvirus type 1 activates transcription directed by the long terminal repeat of feline immunodeficiency virus." Virology. 184. 449-454 (1991)

Kawaguchi, Y. 等人：“猫疱疹病毒 1 型激活由猫免疫缺陷病毒长末端重复序列指导的转录。”

Miyazawa,T.et al: "Molecular cloning of a novel isolate of feline immunodeficiency virus biologically and genetically different from the original U.S.isolate." J.Virol.65. 1572-1577 (1991)

Miyazawa,T.等人：“猫科免疫缺陷病毒新型分离株的分子克隆，在生物学和遗传上与美国原始分离株不同。”