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かごめATP光分解後の筋細胞内ATP加水分解経過を蛍光色素で高速に記録する試み

尝试使用荧光染料快速记录 Kagome ATP 光解后肌内 ATP 水解的进展

基本信息

批准号：
03223213
负责人：
堀内桂輔
金额：
$ 0.64万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

筋収縮蛋白はATPの加水分解によって、ATPの化学エネルギ-を収縮の力学エネルギ-に変換する。本研究では、ケ-ジドATP閃光分解による急速な筋細胞収縮のトランジェントを解析するという方法により、上記エネルギ-変換メカニズムを考察することを試みた。pH色素の蛍光信号の同時測定によって、トランジェントにおけるプロトン遊離と張力発生の関係を調べることが当初の予定であったが、予備実験の途上で、張力トランジェント自体に新しい発見があったので、それに焦点を絞って本年度の研究を進めた。ラット脹腰筋から得たスキンドファイバ標本を先ずATP無しCa有りの硬直状態に置いた。実験温度は15℃。大量ATP(約400μM)のパルスをケ-ジドATP光分解によって標本に与えると、既に知られているような速さで、弛緩とそれに引き続く収縮とが観察された。大量ATPによる活性化の前に生理的な収縮状態を実現するため、予め少量ATP(約100μM)のパルスを標本に与え、それが消費尽くされた頃(約600ms後)に上記と同じ大量ATPを適用し、この時のトランジェントを対照と比較した。予め少量ATPで活性化した標本では、大量ATPによる一過性の弛緩が小さく、それに不釣り合いに収縮が速かった。モデルによる解析では、弛緩が約2.6倍遅いだけではなく、引き続く収縮が約3.6倍速くなっていると解釈された。従来、硬直状態は収縮の中間状態の最後のひとつであると考えられてきていた。しかし上記のように、収縮状態から始めたトランジェントが硬直状態からのトランジェントより速い収縮を示したから、「硬直は収縮の最終状態である」という従来の仮説は誤っている可能性がある。硬直は、ATP不在下においてのみ現れる非生理的な状態であるのかもしれない。

The protein is related to the hydrolysis of ATP, the chemical reaction of ATP, and the mechanical reaction of ATP. In this study, we investigated the method of rapid muscle cell contraction analysis in ATP flash decomposition. This year's research is progressing on the relationship between simultaneous determination of pH pigment optical signal and tension generation. The first step is to set the ATP level in the middle of the hard state. The temperature is 15℃. A large amount of ATP(about 400μM) was detected in the photolysis of ATP. A large amount of ATP is activated before physiological contraction occurs, and a small amount of ATP(about 100μM) is consumed immediately (about 600ms later). A small amount of ATP is activated, a large amount of ATP is activated, a small amount of ATP is activated, a small amount of ATP is activated, and a large amount of ATP is activated. The resolution of the film is about 2.6 times faster than that of the original film. The final state is the hard state, the intermediate state, and the hard state. In the case of a hard straight state, a hard straight state and a final state of a hard straight state, there is a possibility that the hard straight state will be wrong. Hard, ATP is not under the middle of the heart and appear in the non-physiological state.