細胞懸濁液中の衝撃波の伝播とその細胞破壊および生体機能成分に与える影響

冲击波在细胞悬液中的传播及其对细胞破坏和生物功能成分的影响

• 批准号: 03238209
• 负责人: 手島 光司
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyoto University of Education
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03238209/
• 关键词: 衝撃波; 細胞破壊; フェニルアラニン脱水素酵素; スフェプラスト; 大腸菌遺伝子組換え体; 泡の崩壊; 酵母; 遺伝子

昨年度開発した簡単に操作できる衝撃波発生装置を用いて、取扱いが容易な大腸菌などの微生物細胞を対象に衝撃波の影響を定量的に評価する方法について種々検討した。昨年度明らかにした、フェニルアラニン脱水素酵素活性を増強した大腸菌の組換え体(E.coli JM109/pKPDH2)のスフェロプラストを利用すると、衝撃波の細胞破壊を漏出酵素活性の測定から定量的に評価できることを踏まえ、今年度は大腸菌だけでなく、真核細胞の酵母細胞および遺伝子や酵素などの生体機能成分に対しても検討した。また、スフェロプラストに衝撃波を照射する際にはその培養液中に多量の泡の広生が認められるため、細胞破壊に対する泡の影響を調べた。主な結果は以下の通りである。1)泡の発生が認められるスフェロプラストを用いる系では衝撃波の照射により酵素の細胞からの顕著な漏出があったが、消泡剤を加えた同様な系では衝撃波の照射後酵素の漏出は検出できなかった。同様の試験を、スフェロプラストの代わりに大腸菌細胞(Intact cell)を用いて行なった結果、起泡剤を加えた系では衝撃波による細胞破壊による酵素の顕著な漏出が認められ、衝撃波による大腸菌細胞の破壊に泡が重要な働きを持つことが確かめられた。2)細胞内小器官を有する真核細胞として酵母(Candida boidinii DSM 70026)を用いて衝撃波の影響を細胞の死滅度から調べた。衝撃波の照射回数の増大とともに、生育するコロニ-数の減少が認められ、衝撃波により酵母細胞内の小器官(ミトコンドリア、核など)の破壊が起こり細胞が死滅することが予想できた。3)細胞内遺伝子に対する衝撃波の影響を調べるため、Salmonella typhimulium TA1535/pSK1002の菌株を使って、変異原性を調べる方法を試みたが、衝撃波による顕著な影響は見られなかった。

It was opened last year and it is easy to operate and easy to use. The quantitative evaluation of the influence of microbial cells on the image of the impact wave was carried out using the method. Last year's Ming Dynasty's らかにした, フェニルアラニン dehydrase enzyme activity was strengthened and the coliform bacteria (E.coli JM109/pKPDH2) Quantitative evaluation of JM109/pKPDH2) by measuring the enzyme activity through cell rupture and leakage of Okinawaることを台まえ, this year's coliform bacteria だけでなく, eukaryotic cell のyeast cell および缝子やzyme などのbiofunctional ingredient に対しても検曰した.また, スフェロプラストに撃波を irradiation する久にはその in the culture medium The amount of bubbles and the effects of the bubbles are the same as that of the cells. The main result is the following. 1) Soak の発生がcognize められるスフェロプラストを Use いる-type では 撃波のirradiation によりEnzyme のcellular からの桕We use the same method as the anti-foaming agent and the では flushing wave after irradiation. Intact cell)をUsing the いて line and the result, the foaming agent and the えた system, the flushing wave, the cell breaking, the enzyme, and theなleaks out and recognizes められ, flushes and waves によるcoliform cells の壊に bubble がimportant な働きをhold つことが正かめられた. 2) The small organs in the cells have the effect of eukaryotic cells and yeast (Candida boidinii DSM 70026), which can affect the degree of death of the cells by the impact of the waves. The number of times of irradiation of the wave has increased, the number of births has increased, the number of births has decreased, and the number of irradiations has decreased, and the number of waves has increased, and the number of the waves has increased The small organ inside the cell (ミトコンドリア, nuclearなど) is broken and destroyed, and the cell is destroyed and destroyed. 3) Intracellular inheritance, Salmonella typhimulium The strain of TA1535/pSK1002 has been tested, the heterogenicity has been adjusted, the test method has been tested, and the effects of irritating the waves have been tested.

项目成果

T.Ohshima,S.Tanaka,K.Teshima: "Effect of Shock Waves on Microorganisms:The Evaluation Methods of the Effects" Proceedings of the 18th International Symposium on Shock Waves,Springer International. (1992)

T.Ohshima，S.Tanaka，K.Teshima：“冲击波对微生物的影响：影响的评估方法”第十八届国际冲击波研讨会论文集，施普林格国际。