心筋細胞の異常興奮と細胞内各種イオン濃度の相関

心肌细胞异常兴奋与细胞内各种离子浓度的相关性

• 批准号: 03253208
• 负责人: 金出 英夫
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03253208/
• 关键词: 心筋細胞; 細胞質Ca濃度; NADH蛍光; NaーH交換; NaーCa交換; アシド-シス

心筋細胞のNH_4Cl prepulse刺激後に見られるアシド-シスからの回復において、Na^+ーH^+交換系が主役を演じていることを、平成2年度に示した。本年度は、これをさらに確認する実験を行った。マウス胎児培養心筋細胞に2MMフラ-2/AMおよび3MM BCECF/AMを取込ませ、顕微鏡蛍光測光によって、細胞質Ca^<++>濃度(Ca^<++>)iおよびpH変化を記録した。15mM NH_4clを添加すると、心筋細胞のpHは、急激・一過性のアルカロ-シス後、次第に正常へ戻ろうとする。次いでNH_4clを除去すると、急激・一過性のアシド-シスの後、正常に復した。このアシド-シスからの回復は(Na)_0=0および特異的Na^+ーH^+交換阻害剤(30MM)5ー(NーlthylーNーisopropyl)amiloride(EIPA)で完全に阻害された。したがってアシド-シスからの回復は、Na^+ーN^+交換によるH^+の汲み出しによって引起こされることが明らかとなった。通常のNH_<4-> cl prepulseの場合、あるいはEIPAによってNa^+ーH^+交換を阻害し,アシド-シスのままにした場合,(Ca^<++>)iはほとんど変化しない。ところが(NA)_0=0によってアシド-シスからの回復を阻害した場合には、NH_4clおよびNa^+の除去に際して、一過性の(Ca^<++>)i上昇が観察された。この一過性の(Ca^<++>)i上昇は、Na^+ーCa^<++>交換の特異的阻害剤10MM chlorobenzyl dimethyl benzamil(CBDMB)によって完全に阻害された。また細胞外のpH依存性であり、アルカリに傾くほどアシド-シスからの回復は容易となり、一過性の(Ca^<++>)i上昇は顕著となった。(Ca^<++>)_0=0とする一過性の(Ca^<++>)i上昇は認められなかった。したがって、(Na^+)_0=0によってアシド-シスの回復を阻害した際に見られる一過性の(Ca^<++>)i上昇は、Na^+ーCa^<++>交換系によることが示唆された。これらの所見から、NH_4cl prepulse刺激においては、アシド-シスからの回復に直接かかわるのは、Na^+ーH^+交換系であること、(Na^+)_0=0として、アシド-シスからの回復を阻害したときに認められる(Ca^<++>)iの上昇は、Na^+ーCa^<++>交換によることが明らかとなった。

After NH_4Cl prepulse stimulation, the recovery and Na^+-H^+ exchange system of cardiac muscle cells were observed. This year's annual report confirms that 2MM CCF/AM, 3MM CCF/AM, 2 MM CCF/AM, 2 MM CCF/AM, 3MM CCF/AM, 4 MM CCF/AM, 5 MM CCF/AM, 4 MM CCF/ 15mM NH_4Cl was added to the culture medium, and the pH value of cardiac muscle cells was changed after acute stimulation, transient stimulation and normal stimulation. NH_4Cl was removed from the medium, and the transient state was recovered. The recovery of this phenomenon is (Na)_0=0 and the specific Na^+-H^+ exchange inhibitor (30MM)5-(N-lsyl-N-isopropyl)amiloride(EIPA) is completely inhibited. The first step is to restore the Na^+-N^+ exchange to the original state. In general, when NH_<4->cl pulse is used, EIPA is used to inhibit Na^+ H^+ exchange, and when (Ca^++&gt;)i is used to inhibit Na ^+ H^+ exchange, EIPA is used to inhibit Na ^+ H ^+ exchange. When (NA)_0=0, NH_4Cl and Na^+ are removed, a transient increase in (Ca^&lt;++&gt;)i is observed. This transient (Ca^&lt;++&gt;)i increase is completely inhibited by the specific inhibitor 10MM chlorobenzyl dimethyl benzamil(CBDMB) for Na^+-Ca^&lt;++&gt; exchange. Extracellular pH dependence is easy to recover, transient (Ca^&lt;++&gt;)i increases and decreases. (Ca^&lt;++&gt;)_0=0 Transient (Ca^&lt;++&gt;)i rise (Na^+)_0=0, and (Ca ^+)_0=0. When the recovery is blocked, the transient increase of (Ca^+)_1, Na^+-Ca ^+++-exchange system, and the decrease of Na^+-Ca^++-exchange system are observed. NH_4cl prepulse stimulation, Na^+ H^+ exchange system, Na^+, Ca ^++ exchange system, Na^+ exchange system, Na^+ exchange system

项目成果

Y.Shogakiuchi: "Cytosolic calcium transients differ between porcine coronary arterial and aortic smooth muscle cells in primary culture." Circ Res. 68. 818-826 (1991)

Y.Shogakiuchi：“原代培养物中猪冠状动脉和主动脉平滑肌细胞的胞浆钙瞬变不同。”

H.Aoki: "Endothelin induces the Ca^<2+>ーtransientsin endothelial cells in situ." BioChem Biophys Res Commun. 181. 1352-1357 (1991)

H.Aoki：“内皮素原位诱导内皮细胞中的 Ca^<2+>-瞬态。” BioChem Biophys Res Commun。 181. 1352-1357 (1991)

H.kai(eds;M.Inoue,M.Hori,S.Imai,RM.Berne): "Regulation of Coronary blood flow." SpringerーVerlag, 242-253 (1991)

H.kai（编辑；M.Inoue、M.Hori、S.Imai、RM.Berne）：“冠状动脉血流的调节”，Springer-Verlag，242-253（1991）

K.Hirano: "Temporal changes in the calciumーforce relation during histamineinduced contractions of strips of the coronary artery of the pig." Br J Pharmacol. 102. 27-34 (1991)

K. Hirano：“组胺诱导的猪冠状动脉收缩过程中钙-力关系的时间变化。” Br J Pharmacol。 102. 27-34 (1991)

H.Yamamoto: "Dextran sulfate inhibits the inositol 1,4,5ーtrisphosphateーinduced Ca^<2+> release from skinned and cultured smooth muscle cells." Eur J Pharmacol. 206. 175-179 (1991)

H. Yamamoto：“硫酸葡聚糖抑制去皮和培养的平滑肌细胞中肌醇 1,4,5-三磷酸诱导的 Ca^2+ 释放。”Eur J Pharmacol。