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内皮・平滑筋・繊維芽細胞の三次元共培養による血管構築を摸した血管モデルの作製

通过内皮、平滑肌和成纤维细胞的三维共培养来创建模拟血管构建的血管模型

基本信息

批准号：
14657174
负责人：
金出英夫
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

動脈硬化や血管形成術後の血管局所では、収縮性の亢進・攣縮を認めることがある。病変局所の平滑筋細胞や浸潤・増殖細胞において、収縮性亢進に関係する種々の酵素・蛋白質の発現変化が起こっている、と一般に考えられているが、その直接証拠は少ない。人工血管を作製し、これらの酵素・蛋白質の遺伝子を人工血管壁構成細胞に発現させることによって、収縮性の亢進・攣縮におけるその役割の直接証明が可能となる筈である。本年度は線維芽細胞のcell lineであるNIH3T3細胞を用いる事によって、等尺性収縮を測定可能な人工血管中膜モデルを作成した。さらにNIH3T3細胞に高効率に遺伝子導入できるベクターを開発し、CPI-17の過剰発現による線維芽細胞の収縮性の変化を検討した。CPI-17を過剰発現させた細胞とコラーゲンゲルを用いて作製した血管中膜モデルのリング標本は、PKCの活性化剤であるPDBuの投与により、10%FBSによる収縮の2-3倍の張力を発生した。一方、ベクターだけを発現させたコントロールではPDBuの投与により、むしろ基線以下に弛緩した。また、PKCによるリン酸化部位である38番目のThrをAlaあるはGluに変異させたCPI(CPI38AおよびCPI38E)では、PDBuによる収縮は得られず、コントロールと同様に弛緩した。CPI-17を過剰発現させた細胞のPDBuによる収縮は、PKC inhibitorであるGF109203Xにより抑制されたが、Rho kinase inhibtorであるY27632では抑制されなかった。線維芽細胞を中膜構成細胞として作製した人工血管モデルにおいては、PKCの活性化は本来は弛緩を起こすが、CPI-17を発現させると収縮に転じることが明らかになった。

After the formation of blood vessels in the vascular bureau after the formation of vascular sclerosis, the blood vessels became hyperactive and abnormal. The smooth gluten cells of the disease bureau have been immersed in the cells of the colonies, the enzyme proteins of various enzymes have been induced, and they have been tested in general and directly. The wall of the artificial blood vessel is formed into a cell by the formation of the artificial blood vessel, which shows that the artificial blood vessel is damaged, and the artificial blood vessel wall is formed into an artificial blood vessel. This year, it is possible that the artificial vascular media may be made by using cell line cells and isoscale micrometers to determine the size of the artificial vascular media. The higher the rate of cell infection, the higher the rate of NIH3T3 infection. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of cell failure. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of cell failure. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of cell failure. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of cell growth. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of cell growth. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of cell growth. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of cell growth. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of cell growth. The higher the rate of cell growth, the higher the rate of failure. CPI-17 was used as a marker for vascular intima-media markers, PKC was activated for PDBu, and 10%FBS was 2-3 times more potent. On the other hand, you may need to know that you are going to invest in the PDBu and relax your position below the base line. The acidified parts were acidified by Thr, PKC, Ala, Glu, CPI (CPI38A, CPI38E), PDBu, and so on. The CPI-17 filter results in PDBu screening, PKC inhibitor screening, GF109203X suppression, and Rho kinase inhibtor screening, Y27632. The medial membrane of the stem cell is formed into a cell membrane, which is used as an artificial blood vessel. The activation of PKC is caused by the activation of the artificial blood vessel, the activation of the artificial blood vessel, the activation of the cell, and the activation of the CPI-17.