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心筋のカルシウム過剰負荷と細胞障害との相関に関する研究

心肌钙超载与细胞损伤的相关性研究

基本信息

批准号：
63624510
负责人：
金出英夫
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

乳児ラット心臓のCaパラドックス心筋障害におけるCa動態変化を調べ、Ca過剰負荷と心筋障害の関係を検討した。〔方法〕乳児ラットの心臓を摘出し、Langendorff法により40cm水柱圧で定圧灌流した。灌流液としては1.3mMCaCl_2及び5.5mMブドウ糖を含むCarbonate緩衝液を用いた。摘出心臓にCa指示色素Fura-2/AMを取り込ませた後、無Ca液で5分間灌流し、さらにCa再灌流を行った。我々の開発による表面蛍光2波長励起測光システムを用いてFuva-2蛍光を測定し、細胞質Ca濃度(Ca)iの指標とした。灌流液中のCPK量を測定し、心筋障害の指標とした。〔結果〕生後8日目以前のラット心臓では無Ca灌流によって(Ca)iは次第に低下し定常状態となった(121nM→31nM)。この際、心拍動は停止した。5分後に1.3mMCa液を再灌流すると(Ca)iは正常値に復し、CPKの漏出も認められなかった。生後9日目から14日目のラット心臓では、Ca再灌流後、(Ca)iは上昇し定常状態(187nM)となりCa過剰が認められた。しかし、80%の心臓が収縮を回復し、CPKの漏出は認められなかった。80cm水柱圧で定圧灌流した成熟ラット心臓では、Ca再灌流後、(Ca)iの上昇に伴ってCPKが漏出し、電顕的にはContracture bandが認められた。〔総括〕生後8日目以前のラット心臓ではCa過剰負荷も心筋障害も起こらなかった。生後9日目から14日目のラット心臓ではCa過剰負荷が出現したにも関らず、心筋障害は認められなかった。成熟ラット心臓では明らかなCaパラドックス心筋障害が認められた。従って、Caパラドックスにおける心筋障害の発現には、Caの過剰負荷のみならず、心筋細胞の成熟に伴う膜機能(特にイオン交換機能)、あるいは、構造の変化を必要とすると考えられる。

The relationship between Ca overload and heart muscle damage was discussed. [Method] The heart of the breast was extracted by Langendorff method, and the pressure of water was 40cm. Perfusion solution was mixed with 1.3mM CaCl2 and 5.5mM CaCl2 and Carbonate buffer. After removing the Ca indicator Fura-2/AM from the heart, 5 minutes of perfusion without Ca solution and 5 minutes of Ca reperfusion were performed. The measurement of plasma Ca concentration (Ca)i by Fuva-2 fluorescence is an indicator of the development of surface fluorescence 2 wavelength excitation photometry. CPK content in the perfusate was measured, and indicators of cardiac dysfunction were determined. [Results] Before 8 days after birth, the heart was in a state of no Ca perfusion, and then in a state of steady state (121nM→31nM). When the heart beats, it stops. 5 minutes later, the 1.3 mM Ca solution was reperfused and the CPK was released. After 9 - 14 days of life,(Ca)i increased to a steady state (187nM). 80% of the heart is shrinking, CPK is leaking, 80cm H2O pressure constant pressure perfusion, mature heart, Ca reperfusion,(Ca)i rise accompanied by CPK leakage, electrical contraction band is recognized. [Summary] Before 8 days after birth, the heart was damaged by Ca overload. The 9 th day after birth, the 14 th day of the birth, the birth, the 14 th day of the birth, the birth, the 14 th day of Mature heart disease is a serious problem. The development of cardiac muscle damage due to calcium overload, the maturation of cardiac muscle cells associated with membrane function (especially the exchange function), and the structural transformation of cardiac muscle cells are necessary.