発光蛋白質エクオリンの生物発光における超分子構造のダイナミクス

发光蛋白水母发光蛋白生物发光中超分子结构的动力学

• 批准号: 06240221
• 负责人: 大橋 守
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Electro-Communications
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06240221/
• 关键词: 生物発光; 化学発光; エクオリン; フォトラベル; 超分子; トリフルオロメチルジアジリン; カルシウム; 発光蛋白質

オワンクラゲの発光蛋白質エクオリンはCa^<+2>イオンの存在下Blue Fluorescent Protein(BFP)の励状態を生じ460nmに発光する.エクオリンは発光基質セレンテラジンとアポエクオリン(189 アミノ酸残基から成るアポ蛋白質)及び分子状酸素から組立てられているが,その精緻な構造は明らかにされていない.本研究ではこの生物発光に関与する超分子構造のダイナミクスを解明するため以下の検討を行った.1)この構造解明に関連してアポエクオリンの活性部位をフォトラベル法により解明することを計画し,光感作性基トリフルオロメチルジアジリン基を有するセレンテラジン及びセレンテラミドの合成に成功した.この光感作性セレンテラジンも天然型と同様にアポエクオリンに取り込まれ,生物発光を行うことを確認した.又トリフルオロメチルジアジリン基を持つセレンテラミドは光照射により溶媒中のメタノールと反応することを知った.今後はこの半合成エクオリンを大量に合成し,フォトラベルアポエクオリンの酵素分解,マススペクトロメトリーを組合わせて活性部位を特定する.2)セレンテラジンは環境により多彩な発光を示す.例えば86番目のアミノ酸を変化させたAQW86Fは天然460nmの発光を400nmにシフトさせる.ただ一種のアミノ酸の変化により発光波長が変わることは精緻な超分子構造を予想させる.BFPはEDTA,DTT存在下アポエクオリンとセレンテラミドを共に培養すると再生される.この時N-メチルセレンテラミドを用いても同様な蛍光が観測されることより,従来アミドアニオンの励起状態からの発光とされてきた発光種の構造について,新しくフェノラートアニオンである可能性が生じた.従来の学説の再検討を要する結果となった.この点は更に確認実験を続けている.

In the presence of Blue Fluorescent Protein (BFP) excitation in the presence of light protein, light protein, light, light. In this paper, we use photoluminescence, photoluminescence, photolysis, photolysis, photoluminescence, photolysis, photoluminescence, photoluminescence, photolysis, photolysis, In this study, biomolecules and supramolecules were used to make the following information. 1) the following information was obtained. 1) in this study, we used the supramolecular method to make the following information. 1) in this study, the biochemistry and supramolecular techniques were used in this study. in this study, we used the supramolecular method to make the following information. Based on the photosensitive properties, there are two basic factors, I. E. the synthesis is successful, and the synthesis is successful. This is the same as the natural type of light sensation. This is the same as that of the natural type. The biosensitive light is used to make sure that it is natural. In addition, it is necessary to know that the light is exposed to light in the solvent. In the future, a large number of semisynthetic compounds will be synthesized, the enzymes will be decomposed, and the active parts of the complex will be activated in a specific way. 2) the environmental protection environment will show a lot of colorful light. For example, AQW86F, natural 460nm, light, 400nm, acid, acid and acid. In the presence of BFP

项目成果

Feng-Qi Chen: "Synthesis anf Preliminary Chemi-and Bio-luminescence Studies of a Novel Photolabile Coelenterazine Analoguewith a Trifluoromethyl Diazirin Group" J.Chem.Soc.,Chem.Commun.2405-2406 (1994)

Feng-Qi Chen：“具有三氟甲基二嗪基团的新型光不稳定腔肠素类似物的合成和初步化学和生物发光研究”J.Chem.Soc.，Chem.Commun.2405-2406 (1994)

Tadashi Hirano: "Revision of the Structure of the Light-emitter in Aequorin Bioluminescence" J.Chem.Soc.,Chem.Commun.165-167 (1994)

Tadashi Hirano：“水母发光蛋白生物发光中发光体结构的修订”J.Chem.Soc.,Chem.Commun.165-167 (1994)