発光蛋白質エクオリン生物発光における超分子構造

发光蛋白水母发光蛋白生物发光的超分子结构

• 批准号: 07229216
• 负责人: 大橋 守
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Electro-Communications
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07229216/
• 关键词: 生物発光; 化学発光; エクオリン; GFP; 超分子; フォトアフィニティラベル; オワンクラゲ; 発光蛋白質

発光オワンクラゲの発光システムは励起分子を生成する蛋白質エクオリン(AQ)と,この励起エネルギーを受容して緑色蛍光を放出する緑色蛍光蛋白質(GFP)から構成されている。AQは発光基質セレンテラジン(CZ)とアポエクオリン(ApoAQ)と酸素分子の複合体であり,カルシウムイオンと結合して生物発光する。発光種はApoAQとセレンテラミドからなる超分子青色蛍光蛋白質(BFP)である。一方GFPは翻訳後修飾によりポリペプチド主鎖の3個のアミノ酸残基が発色団を形成しているといわれている。本研究ではAQ生物発光におけるAp-AQ-CZ間及びAQ-GFP間で構築される超分子構造と発光の分子過程との関係を明らかにすることを目的とした。得られた結果を以下に示す。(1)フォトアフィニティラベル法によるAQ超分子構造の解明を目指し,光反応性を有するトリフルオロメチルアジリン基を持つCZアナログから半合成AQの合成に成功した。発光活性は天然型の1%であった。アジド基を有するCZアナログの合成にも成功している。(2)GFPの発色団を決定するためWardらにより提唱されているイミダゾロン骨格を有する構造に対応するモデル化合物の合成に成功した。合成品はUV吸収が天然GFPの酵素分解で得られた色素成分と類似の挙動を示し,かつ蛍光特性を持ち,塩基性条件下では510nmに天然GFPの蛍光極大と一致する蛍光を示したので,この部分構造がGFPの発色団であることが証明された。(3)アダマンタン基を有するCZアナログを合成し,生物発光特性の制御を試みた。発光極大は天然型より20nm程短波長で,発光強度は天然型の2倍に達した。

Light, protein, protein, AQ photosensitizer (CZ), biosensor (ApoAQ), acid molecule, complex, bioluminescence, bioluminescence, bioluminescence. The supermolecular cyan (BFP) light protein (BFP) was isolated from the supermolecular cyan. One side of the GFP machine is used to modify the color of the acid residue in the three main parts of the GFP machine to form a negative color filter. In this study, AQ bioluminescence, Ap-AQ-CZ and AQ-GFP photoluminescence supramolecular fabrication of photoluminescence molecules were studied. The results are shown below. The main results are as follows: (1) in this paper, the results show that the synthesis of semisynthetic AQ is successful, and the results are as follows: (1) the results are as follows: (1) in this paper, the results are as follows: (1) the results show that the semisynthetic AQ has been successfully synthesized by using the method of AQ supramolecular synthesis. "photoactive" natural "1%". There is a CZ base for the synthesis of successful products. (2) the GFP color spectrum determines that the compound has been successfully synthesized. (2) the GFP color has determined that the compound has been successfully synthesized. The pigment composition of synthetic UV absorbent natural GFP enzyme is similar to that of dynamic display, and the photoluminescence characteristics are stable. Under basic conditions, the temperature of 510nm natural GFP phosphor is very high, and the phosphor photoluminescence is sensitive, and some of them are used to make the GFP color indicator. (3) there are biosensor synthesis and bioluminescence properties control experiments in the CZ system. The light intensity of the natural type is 2 times higher than that of the natural type, and the light intensity of the natural type is 20 nm.

项目成果

T.Matsuno: "Mass Spctrometric lnvestigation of Structures of Intermediates" J. Mass Spectom.(in press). (1995)

T.Matsuno：“中间体结构的质谱研究”J. Mass Spectom.（出版中）。

F.Q.Chen: "A potential photoaffinity probe for labelling the acive site of aequorin: a pthotolabile coelenterazine analogue with a trifluoro methyl diazirine group" J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1. 1995. 2129-2134 (1995)

F.Q.Chen：“一种用于标记水母发光蛋白活性位点的潜在光亲和探针：具有三氟甲基二氮丙啶基团的光不稳定性腔肠素类似物”J. Chem。

T.Hirano: "Chemi-and Bio-luminescent Properties of Coelenterazine Analogues Possessig an Adam antyl Group" J. Chem. Soc., Chem. Commun. 1995. 1335-1336 (1995)

T.Hirano：“具有 Adam antyl 基团的腔肠素类似物的化学和生物发光特性”J. Chem。