光による葉緑体遺伝子の転写制御機構
光对叶绿体基因转录的调控机制
基本信息
- 批准号:06259211
- 负责人:
- 金额:$ 1.98万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では、葉緑体psbD/C遺伝子クラスターに存在する光応答プロモーター(D/C-3プロモーター)を対象に、核ゲノムによるその活性制御機構を分子レベルで解明することを目的として研究を進め、核コードの転写因子の精製を行いその実体がDNA結合タンパク質であることを明らかにすると同時に、この光応答プロモーターの成熟葉緑体における光応答性について検討した。1.〔D/C-3プロモーターの光応答性の検討〕 成熟葉緑体中でのD/C-3プロモーターの光応答性を、他の葉緑体プロモーター(psbA、D/C-4プロモーター)と比較した結果、D/C-3プロモーターは可逆的に光照射で活性化され、暗所で不活性化されることがわった。D/C-3プロモーターからの転写産物がコードするD2、CP43蛋白質のターンオーバーもD1蛋白質と同様に光強度に依存して加速されることから、D/C-3プロモーターの光応答活性化が、これらの蛋白質の光依存的なターンオーバーの制御と関係している可能性が考えられる。2.〔転写因子の精製と解析〕 成熟葉緑体の排出物を疎水カラムクロマトグラフィーにより分画し、D/C-3プロモーターを特異的に活性化する画分を得た。ゲルシフト実験から、この画分には、D/C-3プロモーター領域(-153〜+6)にシーケンス特異的に結合するDNA結合タンパク質が存在する事がわかった。また。、D/C-3プロモーターの5'領域を順次欠失させたテンプレートを用いてin vitro転写実験を行った結果、その活性には一般的な原核生物タイプのプロモーター領域(-35、-10領域)に加えて、転写開始点の70bp以上上流の配列は必要であることもわかった。従って、D/C-3プロモーターに特有な上流域の配列が光応答転写に関わっていて、この領域に転写因子が結合することで転写を特異的に活性化していると考えられる。
In this study, chloroplast psbD/C genes were found to exist in the presence of light.(D/C-3) The activity control mechanism of the target protein, nuclear protein, molecular protein, molecular protein, protein, protein, 1. [Study on Photoresponsivity of D/C-3] Photoresponsivity of D/C-3 in mature chloroplasts and other chloroplasts (psbA, D/C-4) were compared. The results showed that D/C-3 was reversibly activated by light irradiation and inactivated by dark irradiation. D/C-3 protein is the product of D2, CP43 protein and D1 protein. It is the same as D2, CP43 protein and D1 protein. The light intensity is dependent on the acceleration of D/C-3 protein. The light intensity is dependent on the activation of D/C-3 protein and the control relationship of D/C-3 protein. 2. [Purification and analysis of transcription factors] The mature chloroplast effluents were separated from the D/C-3 by specific activation. D/C-3 is the domain (-153 ~+6) of DNA binding.また。、D/C-3 is a 5'domain that is sequentially missing from the list. It is used in vitro to write the results and activities of prokaryotes in general. It is necessary to add the list to the list of domains (-35,-10 domains) that are 70bp or more from the start point of the list. The D/C-3 is a special type of river basin. It is a special type of river basin. The D/C-3 is a special type of river basin. It is a special type of river basin.
项目成果
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