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導入遺伝子の発現を光で人為的に制御できる植物葉緑体形質転換系の開発

導入遺伝子の発現を光で人為的に制御できる植物葉緑体形質転換系の開発
开发植物叶绿体转化系统，允许通过光人为控制导入基因的表达
批准号：
09874170
负责人：
豊島 喜則
金额：
$1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1997 至 1998
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09874170/
关键词：
葉緑体形質転換転写光プロモーターpsbDpsbA青色光

项目摘要

项目成果

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「自的」葉緑体光応答プロモータを導入した葉緑体形質転換体を作成して、特定タンパク質の葉緑体での発現を特異的に誘導する系の開発を目指した。「結果・考察」1. 光化学系IIのD2タンパク質をコードする葉緑体psbD光応答プロモータからの転写が、恒明条件下で24時間周期の概日リズムによる活性変化を示すことを明らかにした。2. in vitro転写でのプロモータ解析から、葉身下部のPEPは転写開始に-35および-10配列を要求するが、上部の葉緑体PEPは、Extended-10プロモータ配列(psbAプロモータ)あるいは上流エンハンサー配列(psbDプロモータ)を認識することで-35配列を欠いたプロモータからも転写を開始できることを明らかにした。コムギ葉の発達にともなったPEPのプロモータ認識性の変化は、全く新しい発見であり、今後シグマ因子が関与している可能性を検討する。3. psbAプロモータのコントロール下でGFPを発現させるタバコ葉緑体形質転換体を作成した。遺伝子導入条件を最適化した結果、高率で葉緑体形質転換体を得られる系の確立に成功した。蛍光観察から、GFPが葉緑体で特異的に発現していることが確認された。一方、-35配列を破壊した変異プロモータの活性は、野生型に比較して低かった。今後、この系を利用して発達ステージに伴ったPEPのプロモータ認識性の変化についてin vivoで検討する。また、青色光応答性のpsbD光応答プロモータを導入した形質転換体の作成も行い、青色光による特定タンパク質の特異的誘導を試みる。
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会议论文
Hoshida,H.et al.: "Electro paramagnetic rescrance and mutaticnal analyses revealed the involvoment of photosystem II-L subumt in the oxidation step of tyrz by P680^+ to from the tyr-Z^+ P680^+ state in photosystem II" Biochemistry. 36・40. 12053-12061 (199
Hoshida,H.et al.：“电顺磁解析和突变分析揭示了光系统 II-L subumt 参与了 tyrz 被 P680^+ 氧化以形成光系统 II 中的 tyr-Z^+ P680^+ 状态”生物化学 36・40。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Satoh,J.et.al: "characterization of dynamics of the pabD light-induced transcription in wheat chloroplasts." Plant Holecular Biology. 33. 267-278 (1997)
Satoh, J.et.al：“小麦叶绿体中 pabD 光诱导转录的动力学特征。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Nakahira,Y.: "Circadian clock-regulated transcription of the psbD light-responsive promoter (psbD LRP) in wheat chloroplasts." Plant Physiol.118. 1079-1088 (1998)
Nakahira,Y.：“小麦叶绿体中 psbD 光响应启动子 (psbD LRP) 的昼夜节律时钟调节转录。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Nakahira,Y.: "Ciradian-regulated transcription of the psbD light-responsive promoter(psbD LRP)in wheat chloroplasts." Research in Photosynthesis. (印刷中). (1998)
Nakahira, Y.：“小麦叶绿体中 psbD 光响应启动子 (psbD LRP) 的昼夜节律调节转录。”（正在出版）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 12 条
    転写制御における核と葉緑体間のシグナル伝達機構
    • 批准号：
      12025216
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $2.37万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      豊島 喜則
    • 依托单位：
      Kyoto University
    転写制御における核と葉緑体間のシグナル伝達機構
    • 批准号：
      11151218
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $2.56万
    • 财政年份：
      1999
    • 负责人：
      豊島 喜則
    • 依托单位：
      Kyoto University
    転写制御における核と葉緑体間のシグナル伝達機構
    • 批准号：
      10170218
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $2.5万
    • 财政年份：
      1998
    • 负责人：
      豊島 喜則
    • 依托单位：
      Kyoto University
    転写製御における核と葉緑体間のシグナル伝達機構
    • 批准号：
      09274215
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $2.69万
    • 财政年份：
      1997
    • 负责人：
      豊島 喜則
    • 依托单位：
      Kyoto University
    海外基金