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導入遺伝子の発現を光で人為的に制御できる植物葉緑体形質転換系の開発

开发植物叶绿体转化系统，允许通过光人为控制导入基因的表达

基本信息

批准号：
09874170
负责人：
豊島喜則
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09874170/
关键词：
葉緑体形質転換転写光プロモーター psbD psbA 青色光

项目摘要

「自的」葉緑体光応答プロモータを導入した葉緑体形質転換体を作成して、特定タンパク質の葉緑体での発現を特異的に誘導する系の開発を目指した。「結果・考察」1. 光化学系IIのD2タンパク質をコードする葉緑体psbD光応答プロモータからの転写が、恒明条件下で24時間周期の概日リズムによる活性変化を示すことを明らかにした。2. in vitro転写でのプロモータ解析から、葉身下部のPEPは転写開始に-35および-10配列を要求するが、上部の葉緑体PEPは、Extended-10プロモータ配列(psbAプロモータ)あるいは上流エンハンサー配列(psbDプロモータ)を認識することで-35配列を欠いたプロモータからも転写を開始できることを明らかにした。コムギ葉の発達にともなったPEPのプロモータ認識性の変化は、全く新しい発見であり、今後シグマ因子が関与している可能性を検討する。3. psbAプロモータのコントロール下でGFPを発現させるタバコ葉緑体形質転換体を作成した。遺伝子導入条件を最適化した結果、高率で葉緑体形質転換体を得られる系の確立に成功した。蛍光観察から、GFPが葉緑体で特異的に発現していることが確認された。一方、-35配列を破壊した変異プロモータの活性は、野生型に比較して低かった。今後、この系を利用して発達ステージに伴ったPEPのプロモータ認識性の変化についてin vivoで検討する。また、青色光応答性のpsbD光応答プロモータを導入した形質転換体の作成も行い、青色光による特定タンパク質の特異的誘導を試みる。

In response to the system light, the system is designed to be used as a system, and a specific system is used to detect the characteristics of the system. "result investigation" 1. Department of Photochemistry, II, D2, equipment, photochemistry, photoperiod, photochemistry, photochemistry. 2. In vitro is required to analyze the system, the lower part of the body is used to write the PEP, and the lower part of the body is written to start with-35% of the configuration requirements, and the upper part of the column is called PEP. The Extended-10 configuration (psbA system) requires that the upstream configuration (psbD) requires the allocation of information. The configuration of the configuration (psbD) requires that you begin to read the information of the user. In the future, there will be a lot of information about the possibility and the possibility that there will be a lot of new information on the basis of the fact that there is no need to PEP. 3. PsbA, make sure that you can see the shape of the body in the GFP. The results of the optimal conditions and the high rate of physical fitness are important to ensure the success of the system. The light inspection, the GFP system and the special system show that you need to make sure that you do not want to receive any information. One side,-35 is equipped with "broken", "wild", "active" and "wild type". In the future, the system will use the information to make sure that you can use the information to help you PEP your partner. You will have to use the in vivo to make you feel better. Green and cyan light response psbD light response response is to enter the shape of the body to make a row, and the cyan light is used as a guide for specific characteristics.