栽培植物に窒素固定力を付与する試み

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本年度は、ミヤコグサおよびアルファルファを用いてトランスポゾンタギングを行うため、ミヤコグサ(Gifu strain)およびアルファルファ(ランジェランダダ-)を用いてトウモロコシのトランスポゾンの系(AcおよびDs)を導入することを試みた。ミヤコグサではグリーンカルスの形成率は高いが、最終的にシュート形成し、形質転換植物になるものはなかった。アルファルファではシュート形成の率が高く、最終的にDs導入では3つの個体を得、Ac導入では個体は得られていない。アルファルファについては、当初試行錯誤を繰り返していたが、一定の条件で形質転換植物を得る方法が確立された。またミヤコグサより分離した根粒菌を用い、4リットル培養液よりシグナル分子の分離を試みた。結果、アピジェニンによるシグナル分子誘導では、合成がほとんど起こらないことが判明したので、クリシン、ネリンゲニンを用いたが、ナリンゲニンで誘導されることが分かった。そこで、これらのHPLCフラクションをマススペクトルなどで構造決定中である。さらに、茎粒菌(Azorhizobium caulinodans)の根粒形成関与遺伝子をTn5変異導入により分離し、構造解析を行うことも行なっている。今年度はTn5変異株486株を作製し、根粒形成試験を行なった。しかしながら、全ての株が根粒形成し、目的部分の変異株は得られていない。これは、茎粒菌のゲノムサイズが大腸菌にくらべて非常に大きいことが原因ではないかと考えられる。現在、不定根の伸長を著しく促進する株を1株得ており、これが茎粒形成となんらかの係わりをもつのか検討する予定である。