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脊椎動物視物質の分子進化

脊椎动物视觉物质的分子进化

基本信息

批准号：
06273219
负责人：
久冨修
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでに知られている脊椎動物視物質において、良く保存されているアミノ酸配列に対応するオリゴヌクレオチド混合体を作成した。備品として購入したプログラムテンプコントロールシステムを用いて、PCR法により脊椎動物(約20種)のゲノムDNAおよびcDNA断片を増幅した。増幅されたDNAをクローニングし、塩基配列からアミノ酸配列を推定した。得られた視物質のアミノ酸配列の相同性を元に、分子系統樹を作成した。その分子系統樹から、次のことが推定された。(1)脊椎動物の視物質遺伝子は、少なくとも5種のサブグループに分類される。(2)これら5種のサブグループは、脊椎動物のうちで最も下等なヤツメウナギが他の高等脊髄動物と分岐する以前に存在していた。(3)ヒトの赤視物質と緑視物質が分岐したのは、狭鼻猿類と広鼻猿類が分岐した頃である。以上の推定を元に、脊椎動物視物質の多様性を分子レベルで説明することができた。ウシ・ロドプシンcDNAの6カ所に制限酵素認識配列を導入した変異cDNAを作成し、動物細胞用の発現ベクターに挿入した。ヒト腎臓由来の組織培養細胞中で強制発現させたウシ・ロドプシンは、実際に網膜から単離したものと同様な吸収スペクトルを示した。また、他の視物質遺伝子とのキメラcDNAを作成し、吸収極大波長やヒドロキシルアミンとの反応性を調べた。

The vertebrate visual substance is stored in the medium and preserved in the medium. The spare parts purchased from the company have been used to increase the number of essential human DNA and cDNA fragments of vertebrates (about 20 species) using PCR. The DNA sequence was determined by DNA sequencing. A molecular phylogenetic tree was constructed based on the identity of the acid sequence. The molecular phylogenetic tree is divided into two parts. (1)5 species of vertebrate visual substance are classified as follows: (2)The five species of vertebrate are the lowest species of vertebrate and the highest species of vertebrate. (3)The red matter and green matter are divided into two groups: narrow nose ape and narrow nose ape. The above putative elements and the diversity of vertebrate visual substances are explained in detail. The gene expression of the 6-part restriction enzyme cDNA was introduced into the gene expression system, and the gene expression system for animal cells was developed. The stress response in kidney derived tissue culture cells was demonstrated in the presence of a single donor cell. In addition, other visual substance genes are generated, and the absorption wavelength is modulated.