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胸腺腫発生遺伝子Tsr-1の分子生物学的研究

胸腺瘤发生基因Tsr-1的分子生物学研究

基本信息

批准号：
06280213
负责人：
松山睦司
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06280213/
关键词：
胸腺腫発生遺伝子 Tsr-1 胸腺増大遺伝子 Ten-1 Ten-2 胸腺サイズ抑制遺伝子

项目摘要

我々は、ホト胸腺腫と全く類似の形態を示す上皮性胸腺腫をほぼ全例に自然発生させる近交系ラットBUF/Mnaを樹立し、維持している。この胸腺腫発生は単一の優性遺伝子Tsr-1により統御されており、その発現の場は胸腺上皮細胞であることを明らかにした。本系ラットには胸腺腫発生以前に胸腺真性過形成が100%に発生し、その過形成胸腫の中に胸腺腫小結節が発生して来ることが確認された。遺伝学的検索から、この胸腺真性過形成の発生は、優性胸腺増大遺伝子Ten-1およびTen-2によって統御されていることを実証した。このTen-1またはTen-2のいずれかが胸腺腫発生遺伝子Tsr-1と同一遺伝子である可能性が非常に高いと予想されるので、まず両遺伝子のmappingを行い、いずれがTsr-1であるかを判定する。1.Ten-1およびTen-2の分子遺伝学的解析:6週令の{(WKY X BUF/Mna)F1 X BUF/Mna}退交配ラットの脾組織より長鎖DNAを抽出し、297個のラットおよび73個のマウスmicrosatellite markerと4個のRFLP probeを用いてPCR法およびRFLP法解析による多型をtypingし、胸腺サイズとの連鎖解析を行った。Ten-1は第1染色体に位置するD1Mgh11遺伝子の4cM近位に、Ten-2は第13染色体に位置するD13N2遺伝子の5cM近位に存在していた。上記退交配ラットのD1Mgh11およびD13N2遺伝子のgenotypeと胸腺サイズとの相関関係を検索したところ、Ten-1はTen-2に比し、胸腺増大能が高かった。また、第3染色体に位置するMIT-R244とMIT-R593遺伝子の間に、胸腺サイズ増大を抑制する遺伝子が存在することも明らかになった。2.Ten-1およびTen-2遺伝子導入コンジェニックラットの樹立:両遺伝子を退交配法により胸腺腫嫌発系のWKY系ラットに導入したcongenic rat(WKY-Ten-1/Ten-1-Ten-2/Ten-2)を樹立するため、退交配を繰り返し14代に達している。Ten-1及びTen-2遺伝子とPCR marker(D1Mgh11およびD13N2)との連関を指標として、両遺伝子保有を想定されるラットを検出し、退交配の効率化と迅速化を実現した。今年度の研究により、Ten-1に4cM、及びTen-2に5cMに迫ることが出来た。現在BUF/Mna系と野性由来の純系ラットMITEとの退交配ラット、及びマウス用に開発された約4000のmarkerの中、ラットに有用で多型を示すものを選び、両遺伝子に1cM以内に迫りたい。これらの遺伝子とcongenic ratを活用して、YAC法またはウォーキング法で両遺伝子をクローニングし、Tsr-1との異同を明らかにしたい。

All of the thymoma were similar in morphology and showed epithelial thymoma. All of the thymoma were naturally developed and the inbred lines BUF/Mna were established and maintained. The development of thymic epithelial cells is controlled by Tsr-1, which is a superior gene. This system is confirmed by the occurrence of thymic nodules before thymic swelling occurs, and the occurrence of thymic nodules before thymic swelling occurs. The development of genetic engineering, the development of genetic engineering. Ten-1 and Ten-2 have a high probability of identifying thymic tumor gene Tsr-1 and the same gene Tsr-1. 1. Molecular genetic analysis of Ten-1 and Ten-2:297 DNA fragments from spleen tissue of 6-week-old {(WKY X BUF/Mna)F1 X BUF/Mna} were extracted and 73 DNA fragments from spleen tissue of 6-week-old {(WKY X BUF/Mna) F1 X BUF/Mna} were analyzed by PCR and RFLP. Ten-1 is located at the 4cM position of chromosome 1, and Ten-2 is located at the 5cM position of chromosome 13. The relationship between the genotype and thymus of D1Mgh11 and D13N2 genes was studied. Ten-1 and Ten-2 genes were compared. Mit-R244 and Mit-R593 genes are located on chromosome 3, and the expression of mit-R244 and mit-R593 genes is inhibited by thymic amplification. 2. Ten-1-Ten-2 gene introduction and establishment: WKY-Ten-1/Ten-1-Ten-2/Ten-2 gene introduction and establishment of WKY-Ten-1/Ten-1-Ten-2/Ten-2 gene introduction and establishment of WKY-Ten-1/Ten-2/Ten-2 gene introduction and establishment of WKY-Ten-1/Ten-2/Ten-2 gene introduction and establishment of WKY-Ten-1/Ten-2 gene introduction and establishment of WKY-Ten-1/Ten-2/Ten-2 gene introduction and establishment of WKY-Ten-1/Ten-2 gene introduction and establishment of WKY-Ten-1/Ten-2 gene introduction and establishment. Ten-1 and Ten-2 markers and PCR markers (D1Mgh11 and D13N2) are linked to indicators, retention of markers, detection, and rapid degradation of mating efficiency. This year's research on Ten, Ten-1, 4cM, and Ten-2, 5cM, was carried out. Now BUF/Mna is a pure line of wild origin, and its development is about 4000 markers in the middle and middle, and its useful polytype is shown in the selection and selection, and its genetic components are forced within 1 cM. The difference between the original and the original rat is obvious.