ラット胸腺腫発生遺伝子Tsrー1の作用機序に関する研究
大鼠胸腺瘤发生基因Tsr-1作用机制的研究
基本信息
- 批准号:02151024
- 负责人:
- 金额:$ 5.44万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
- 财政年份:1990
- 资助国家:日本
- 起止时间:1990 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1.X亜分画に対するモノクロナル抗体の作製:胸腺腫由来上皮性細胞株(TAD3)培養上清から10kDのポリペプチド(X亜分画)を分離した。この分画はrat thymocyteの増殖誘導活性を持ち、その標的細胞は最も未熟なCD4^ー8^ーthymocyteであることが判明した。このペプタイドを精製し(木下)、抗体作製を試みている(松浦)。2.Tsrー1発現の場の検索:胎齢15日のBUF/Mna、ACI/NMs及びF344系ラットから胸腺を採取し、その一対を4週齢のBUF/Mnaーrnu/rnuあるいはACIーrnu/rnu系ラットの腎被膜下に移植し、18カ月齢で屠殺したところBUF/Mnaの移植胸腺は宿主の系統を問わず全例胸腺腫となったが、ACI/NMsあるいはF344系の胸腺をBUF/Mnaーrnu/rnuに移植しても腫瘍にはならなかった(田口)。3.分子生物学的検索:(1)BUF/MnaおよびACI/NMs系ラットより樹立した良性胸腺腫細胞株3例、悪性胸腺腫細胞株2例、正常胸腺細胞株2例について、EGFR、cーerbBー2、ret、kitの発現をノ-ザンブロット法にて検索した。これらの細胞よりpoly(A)^+RNAを精製し、それぞれの遺伝子cDNAとハイブリダイズした結果、全ての細胞株でEGFRのみの発現を検出した。mRNAのサイズは約10kbと5.8kbで、正常肝のRNAで検出されるEGFR mRNAのサイズと一致していた。発現レベルは良性胸腺腫および正常胸腺由来の細胞株ではほぼ同じレベルであったが、悪性胸腺腫細胞株では数分の1に低下していた(松山、増田)。(2)BUF/Mna系ラット胸腺腫から、サテライトI DNAの92/93bpのモノマ-と185bpのダイマ-をpUC19プラスミドに挿入してクロ-ニングを行った。サテライトI DNAのモノマ-17クロ-ン、ダイマ-8クロ-ンの塩基配列を決定した結果、モノマ-はA、B、C、Dの四つのsubfamilyに分類され、ダイマ-はAB、BC、CDのいずれかの組合せであった。モノマ-の一つのクロ-ンのみは、いずれのsubfamilyにも分類されないため塩基配列を詳しく検討した。その結果、このクロ-ンは姉妹染色分体の不等交差に伴うDNAの欠失とsubfamily間のgene conversionによって生じたと考えられた(松山、守内、有森との共同研究)。4.5.略。
1 X 亜 points draw に す seaborne る モ ノ ク ロ ナ ル antibody の cropping: thymic epithelial cell lines (TAD3) sex is swollen origins culture supernatant か ら 10 kd の ポ リ ペ プ チ ド (X 亜 painting) を separation し た. こ の points draw は rat thymocyte の raised colonization induction activity を hold ち, そ の target cell は も most unripe な CD4 ^ ー 8 ^ ー thymocyte で あ る こ と が.at し た. <s:1> ペプタ ドを ドを refined <s:1> (kinoshita), antibody preparation を test みて る る る(matsuura). 2. The Tsr ー 1 発 の is の field 検 suo: tire 齢 15 の BUF/Mna, ACI/NMs and び F344 is ラ ッ ト か ら thymus を し, そ の a を 4 weeks 齢 seaborne の BUF/Mna ー rnu/rnu あ る い は ACI ー rnu/rnu ラ ッ ト の し に transplantation under renal capsule, 18 カ month 齢 で slaughter し た と こ Thymus は ろ BUF/Mna の transplantation host の system を asked わ ず all cases of thymus gland swollen と な っ た が, ACI/NMs あ る い は F344 is の thymus を BUF/Mna ー rnu/rnu に transplantation し て も swollen sores に は な ら な か っ た (taguchi). 検 suo: (1) (3) molecular biology BUF/Mna お よ び ACI/NMs ラ ッ ト よ り set し た benign thymus swollen cell lines (3 cases), 悪 thymus swollen cell lines in 2 cases, 2 cases normal thymus cell lines に つ い て, EGFR, c ー erbB ー 2, ret, kit の 発 now を ノ - ザ ン ブ ロ ッ ト method に て 検 cable し た. こ れ ら の cells よ り poly real ^ (A) + RNA を refined し, そ れ ぞ れ の posthumous son 伝 cDNA と ハ イ ブ リ ダ イ ズ し た results, full て の cell lines で EGFR の み の 発 now を 検 out し た. About 10 KB mRNA の サ イ ズ は と 5.8 KB で, normal liver の RNA で 検 out さ れ る EGFR mRNA の サ イ ズ と consistent し て い た. 発 now レ ベ ル は benign thymus swollen お よ び normal thymus origin の cell lines で は ほ ぼ with じ レ ベ ル で あ っ た が, 悪 thymus cell lines で swollen は の several points 1 low に し て い た (songshan, raised field). (2) BUF/Mna ラ ッ ト thymus swollen か ら, サ テ ラ イ ト I DNA の 92/93 bp の モ ノ マ - 185 bp の と ダ イ マ - を pUC19 プ ラ ス ミ ド に scions into し て ク ロ - ニ ン グ を line っ た. サ テ ラ イ ト I DNA の モ ノ マ - 17 ク ロ ン, ダ イ マ - 8 ク ロ - ン の salt base with column を decided し た results, モ ノ マ - は A, B, C, D four つ の の subfamily に classification さ れ, ダ イ マ - は AB, BC, CD の い ず れ か の combination せ で あ っ た. モ ノ マ - の つ の ク ロ - ン の み は, い ず れ の subfamily に も classification さ れ な い た め salt base with column を detailed し く beg し 検 た. そ の results, こ の ク ロ - ン は and sisters chromatid の ranging の owe lost a job に with う DNA と subfamily の between gene conversion に よ っ て raw じ た と exam え ら れ た (songshan, keep within, sen と の joint research). 4.5. Omitted.
项目成果
期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Torimoto,Y.: "A monoclonal antibody (8H3) that binds to rat T lineage cells and augments in vitro proliferative responses." J.Exp.Med.172. 1315-1323 (1990)
Torimoto,Y.:“一种单克隆抗体 (8H3),可与大鼠 T 谱系细胞结合并增强体外增殖反应。”
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- 影响因子:0
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Taguchi,O.: "Selfーtolerance and localized auto immunnity." Curr.Opin.Immunol.2. 576-581 (1990)
田口,O.:“自我耐受和局部自身免疫。”Curr.Opin.Immunol.2(1990)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Tominaga,K.: "Acetylcholine receptors on thymic epithelial cells and thymic lymphocytes." Jpn.J.Physiol.40. 12 (1990)
Tominaga,K.:“胸腺上皮细胞和胸腺淋巴细胞上的乙酰胆碱受体。”
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Masuda,A.: "Establishment of functional epithelial cell lines from a rat thymoma and a rat thymus." In Vitro Cell Develop.Biol.26. 713-721 (1990)
Masuda,A.:“从大鼠胸腺瘤和大鼠胸腺中建立功能性上皮细胞系。”
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Asakawa,M.: "Restorative effects of thymosin fraction 5 on reduction in responsiveness of rat thymocytes to allogenic lymphocytes during bladder tumor inducion." Cell.Mol.Biol.36. 265-274 (1990)
Asakawa,M.:“胸腺肽 5 部分对膀胱肿瘤诱导过程中大鼠胸腺细胞对同种异体淋巴细胞反应性降低的恢复作用。”
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