植物の生殖器分化、伸長生長の制御に関与する遺伝子のクローニングと機能の解析

植物生殖器官分化和伸长生长调控基因的克隆及功能分析

• 批准号: 07261203
• 负责人: 山根 久和
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07261203/
• 关键词: シダ植物; Anemia phyllitidis; カルシウム依存性蛋白質リン酸化酵素(CDPK); cDNA; キュウリ(Cucumss sativus); ジベレリン; セリン・スレオニン蛋白質リン酸化酵素

・フサシダ植物Anemia phyllitidisの原糸体からのCA^<2+>依存性プロテインキナーゼ(CDPK)遺伝子のクローニング:植物においてCA^<2+>は様々な生理現象に係わっており、いくつかの系においては、CDPKの関与が示されている。そこで、造精器誘導物質(antheridic acid)処理したA.phyllitidis原糸体より調製したcDNAを鋳型とし、既知のCDPKの保存領域に対応するプライマーを用いてPCRを行い、予想されるサイズ(約800bp)の増幅断片を得た。この断片の両端部分のシーケンスにより数種のCDPKの存在が示された。これらのクローンのうち、発現量の多いものについてORF全長を含むcDNAの塩基配列を決定した。現在、他のクローンについても塩基配列の決定を行っている。・キュウリ胚軸の伸長生長の制御に関与する遺伝子の単離:セリン・スレオニンキナーゼの保存領域をプライマーとし、GA_4(キュウリに伸長生長を制御する活性型GA)処理・未処理のキュウリ胚軸部より調製したcDNAを鋳型としたPCRを行い、GA_4処理で転写発現が促進される遺伝子断片を単離した。その塩基配列を決定したところ、エンドウから同様の手法で光照射により発現が抑制される遺伝子として得られたPsPK3に相同性が認められた。クローン化されたPCR断片をプローブとしてORF全長を含むcDNAの単離、塩基配列の決定を行ってCsPK3と命名した。CsPK3のmRNAレベルは胚軸上部で最も高かったが、頂芽、根、胚軸下部の順に低くなり、子葉ではほとんど痕跡量程度であった。GA_4処理によるCsPK3mRNAの発現誘導は、胚軸上部、下部、及び頂芽において比較的強く認められた。また、オーキシン処理によりGA_4処理の場合より強くかつ短時間で誘導された。また、PsPK3と同様、暗所で徒長している植物体において高かったmRNAレベルは24時間の光照射により脱徒長した植物体において顕著に低下した。

・フサシダPlant Anemia phyllitidisの元縸体からのCA^<2+>dependency プロテインキナーゼ(CDPK) 缝子のクローニング:plant物においてCA^<2+>は様々なphysiological phenomenon にsystem わっており, いくつかの System においては, CDPKのrelated and が Show されている.そこで, spermatozoon inducing substance (antheridic A.phyllitidis raw material and modulated cDNA based on acid) treatment and known CDPK In the preservation area, the に対応するプライマーを use the いてPCRを行い, and I want to use the されるサイズ (approximately 800bp) and the enlarged fragments are obtained. There are several types of CDPK that exist in the fragments and end parts of the CDPK.これらのクローンのうち, 発综合の多いものについてORF full length をcontaining むむの塩婩array をdetermination した. Now, he's done with the decision-making process.・キュウリhypocotyl elongation and growth control control and する伝子の単利:セリン・スレオニンThe preservation area of キナーゼのをプライマーとし, GA_4 (キュウリに elongation and growth control するActive type GA) treated/untreated のキュウリhypocotyl part より modulated したcDNA を鋳 type としThe results of PCR and GA_4 treatment are as follows:その塩组positionをdeterminationしたところ、エンドウから Same technique as the light irradiationでより発appearsがsuppressionされる伝子としてgetsられたPsPK3にidentityがidentificationめられた. The PCR fragment of the クローン化されたPCR fragment をプローブとしてORF full length contains the cDNA isolation and the determination of the base arrangement and the name of the ってCsPK3. CsPK3 mRNA is the highest in the upper part of the hypocotyl, the highest in the terminal bud, the root, and the lowest in the lower part of the hypocotyl, and the traces of the cotyledons are the same. GA_4 treatment showed stronger induction of CsPK3mRNA in the upper and lower hypocotyls, as well as in the apical buds.また, オーキシンtreatment によりGA_4 treatment occasions よりstrongくかつ short-term でinduced された. mRN Aレベルは24 time, the light shines on the body, the plant body is long, the plant body is long, the body is low, and the body is low.